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细胞周期试剂盒Cell cycle staining Kit中文操作步骤

2020.6.15

试剂盒特点:

1、独创的活细胞一步法检测,收集——洗涤——染色,简单快速  

2、兼容固定细胞检测,改进的固定方法,更少细胞粘连,更小CV值  

3、兼容流式和荧光显微镜分析,提供详细protocol

固定细胞处理:

1、收集细胞悬液,细胞数为2 × 10^5 ~ 1 × 10^6。离心沉淀细胞,去上清,轻敲试管,用剩余液体重悬沉淀;加入室温的PBS1ml;

2、将所有的细胞缓慢滴入3ml的冰乙醇(-20℃)中,边滴边高速涡旋振荡。该细胞放在-20℃可保存几个月。

3、离心沉淀细胞,弃去乙醇,轻敲试管使沉淀松散,加入室温PBS 2~5ml,静置15min使细胞再水合。
离心弃上清。

4、加入1 mL的试剂A,涡旋混匀5~10s。室温孵育30min。

活细胞处理:

1、收集细胞悬液,细胞数为2 × 10^5 ~ 1 × 10^6。离心沉淀细胞,去上清。

用PBS洗一次,弃上清。

2、加入1 mL的试剂A和10μL 的试剂B,涡旋混匀5~10s。室温孵育30min。

流式分析:孵育完的细胞悬液直接上机。

荧光显微分析:

孵育完的细胞悬液离心去上清,在新鲜的缓冲液(如PBS)中重悬细胞。

加细胞悬液滴于玻片,盖上盖玻片,用合适的滤片观察。  


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