肾综合征出血热(HFRS)ELISA 试剂盒使用说明（一）
肾综合征出血热(以下简称出血热)是由汉坦病毒引起的一种自然疫源性疾病，是《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病。
我国每年肾综合征出血热发病人数占世界报道的汉坦病毒感染病例的90%以上，是受汉坦病毒危害最为严重的国家。我国大陆的31个省、市、自治区均有病例发生。我国年发病数最高曾超过11万，近十年来我国年报告发病人数一直在2～5万左右，新疫区不断出现，并时有暴发流行，老疫区的类型也有所变化。
因此，开展肾综合征出血热的流行病学监测具有十分重要的意义，德国IBL公司进口原装的肾综合征出血热ELISA试剂盒，已通过欧洲CE认证，可对出血热调查及血清学检测提供可靠的依据。
预期用途
此酶免试剂盒可用于流行性出血热(EHF)病人血清中抗汉坦病毒IgG和IgM的定性检测。
前言简介
流行性出血热(EHF)又称肾病综合征出血热(HFRS)，是由汉坦病毒(Hantaan type)引起的。与流行性肾病相比(因近距离接触普马拉病毒而被传染)，HFRS的传染性更严重，一般都会伴随有尿毒症、呼吸麻痹和伴随有典型休克综合症的出血，甚至死亡。这种疾病起初的症状是流行性感冒样症状。HFRS起初的典型症状是血小板减少症和白细胞增多症。汉坦病毒主要分布于亚洲和巴尔干各邦地区，通过直接接触啮齿动物、啮齿动物的排泄物或分泌物而传染给人。士兵、农民和露营者都特别容易受到危险。
实验原理
包被孔中包被了重组的汉滩型汉坦病毒核壳体蛋白。在检测IgM抗体时，为了避免由IgG抗体或类风湿因子引起的非特异性因素的干扰，病人血清必须与类风湿因子IgG吸附剂一起孵育。
实验过程孵育期间，抗重组汉坦病毒抗原的特异性抗体会结合到固相包被板上。洗板后，我们分别用过氧化酶标记的抗人IgG和IgM抗体检测特异性的IgG和IgM。加入底物液后显色，溶液所显示的颜色强度与结合的抗体量成正比。之后用酶标仪读取OD值。
贮存及稳定性
试剂盒应当在2~8℃运输和储存，避免高温和阳光直射，没有打开的试剂能保存到有效期。包被条在封闭的袋子内2~8℃能保存到有效期。准备好的试剂的储存及其稳定性在相应章节已阐明。
开封的微孔板密封放置2-8℃下可保存至有效期。
样品采集和贮存
人血清
| 注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸的和脂血样品。如果样品出现混浊，则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。此试验要采用人血清样本 | |||
| 储存 | 2-8℃ | ≤-20℃ | 避免热源和太阳直射，避免反复冻溶。 |
| 稳定性 | 5天 | 12mon |
试剂盒成分
| 规格 | 符号 | 成分 |
| 1 x 12 x 8 | MTP | 微孔反应板 即用,可分拆.预包被有重组汉滩型抗原(strain: CG 76-118) |
| 1 x 750 µL | ANTI IgG CONJ CONC | 酶联物(20倍浓缩) 过氧化酶标记抗IgG |
| 1 x 750 µL | ANTI IgM CONJ CONC | 酶联物(20倍浓缩) 过氧化酶标记抗IgM |
| 1 x 1.5 mL | CONTROL + IgG | 阳性质控IgG 即用.内含:人血清,稳定剂,防腐剂 |
| 1 x 1.5 mL | REFCONTROL IgG | 参考对照质控IgG 即用.内含:人血清,稳定剂,防腐剂 |
| 1 x 1.5 mL | CONTROL + IgM | 阳性质控IgM 即用.内含:人血清,稳定剂,防腐剂 |
| 1 x 15 mL | DILBUF CONC | 样品稀释缓冲液(20倍浓缩) 红色瓶盖.内含:PBS，pH7.4，清洁剂和0.01%的硫柳汞 |
| 1 x 1.5 mL | REFCONTROL IgM | 参考对照质控IgM 即用.内含:人血清,稳定剂,防腐剂 |
| 1 x 1.9 mL | CONTROL- | 阴性质控 即用.内含:人血清,稳定剂,防腐剂 |
| 1 x 100 mL | WASHBUF CONC | 洗涤液(10倍浓缩) 内含:PBS缓冲液 |
| 1 x 1.5 mL | RE-AB | 类风湿因子吸附剂 即用.内含抗-人IgG, 稳定剂,防腐剂 |
| 1 x 12 mL | TMB SUBS | TMB底物液 即用.内含:TMB |
| 1 x 12 mL | TMB STOP | TMB终止液 即用.内含0.5 M 硫酸 |
| 1 x | FOIL | 胶粘薄膜 |
