多巴胺ELISA试剂盒使用说明（一）
1、 应用范围
此试剂盒可用于人血浆和尿液中多巴胺的体外定量检测，可手动操作，也可自动操作。进一步的研究表明：此试剂盒还可用于组织匀浆和细胞培养上清液的研究。
2、前言说明
儿茶酚氨类激素肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺主要由肾上腺髓质、交感神经系统和大脑产生。它们几乎影响所有的组织，并与其它激素和神经系统一起参与各种生理过程的调节。在许多疾病中，儿茶酚氨激素及其代谢产物间甲肾上腺素和去甲变肾上腺素的分泌量都会增加，因而这些激素可用于疾病的诊断。所以，这些激素的检测对于疾病的诊断及神经系统肿瘤疾病的具有重要意义。它主要用于嗜铬细胞瘤的诊断，当然也用于成神经细胞瘤和神经节细胞瘤的诊断。因为在实验一开始时有提取步骤，所以用户可使用各种各样的动物材料进行实验。如果用此试剂盒测大鼠、小鼠或其它动物，则儿茶酚氨的化学结构与动物的相同。
3、实验原理
此固相酶联免疫吸附实验利用的是ELISA的夹心法。微孔中包被了羊抗兔抗体。在温育时间之内，加入的溶液抗在体可直接与抗原分子上的一个表位结合。样品中的抗原与酶标二抗（可与抗原分子上的不同表位结合）在包被孔中温育。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接用标准曲线确定。
4、贮存与稳定性
试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃，避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。开封的试剂盒在有效期内稳定，前提是要将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。
5、样品的采集与储存
注意 | 人体内的儿茶酚氨和间甲肾上腺素的释放会受到一些食品和药物的影响。因此在样品采集前72小时内病人应禁止服用下列食物和药品：维生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMT抑制剂，还有降血压类药物。 |
血浆（EDTA）
注意 | 血液采集后两小时内，将血液样品冷藏于2-8℃的环境下直致离心获取血浆。 | ||
注意静脉穿刺采集全血的常规注意事项。从采集到血液样品的那一刻起到检测时都应保持血液样品的化学整体性。不要使用明显溶血、黄疸血和脂血样品。如果样品出现混浊，则在实验前应当离心以除去所有的微粒物质。 | |||
贮存 | 2-8℃ | ≤-20℃ | 避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。 |
稳定性 | 6h | 1个月 |
尿液
可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h内的所有尿液，之后将其加入到10-15ml 6N的HCl防腐剂中。 | ||
贮存 | ≤-20℃ | 避免热源或太阳直射，避免反复冻融，冷冻状态下运输样品。 |
稳定性 | 6个月 |
6、试剂盒成分
注意 | 试剂盒所提供的试剂足够做96孔单孔检测或48孔双份检测。 |
注意 | 此包被板也可用于检测肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺。 |
数量 | 标志 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，单克隆）。 |
1×6×2.5ml | CAL A-F | 标准品A-F 肾上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml(0;8;27;82;273;819nmol/L) 去甲肾上素:0;5.0;15;50;150;500ng/mL(0;30;89;296;887;2955nmol/L) 多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL(0;78;228;750;2938;14688nmol/L) 即用,内含:肾上腺素-去甲肾上腺素-多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl |
1×2×2.5ml | CONTROL 1+2 | 质控品1+2 即用,含: 肾上腺素-去甲肾上腺素-多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl,具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签. |
1×250μL | ENZCONJ CONC | 酶联物 浓缩型（100×） 内含：碱性磷酸酶标记的抗体，Tris缓冲液，HCl，0.01%的NaN3 |
4× | EXTRPLATE | 提取板（微孔板） 每板24孔，包被了硼酸亲和凝胶。 |
2×60ml | EXTRBUF | 提取缓冲液 粉红色，即用，内含：0.016%的NaN3 |
1×1.25ml | COMT LYO | COMT冻干粉 内含：儿茶酚-氧位-甲基转移酶（猪肝），NaN3 |
1×2ml | COMT ADD | COMT添加剂 内含：人血浆，稳定剂，0.01%硫柳汞。 |
1×7ml | ANTISERUM DO | 多巴胺抗血清 紫罗兰色，即用，内含：抗多巴胺抗体（兔），缓冲液，稳定剂。 |
2×1.25ml | COENZ | 酶联复合物 即用，内含：S-腺苷-L-蛋白酸，稳定剂。 |
1×3ml | ENZBUF | 酶缓冲液 即用，内含：Tris缓冲液，HCl，稳定剂。 |
4×13ml | RELEASEBUF | Release缓冲液 黄色，即用，内含：0.1M的HCl，指示剂。 |
2×3ml | ACYLREAG | 酰化试剂 即用，内含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。 |
2×50ml | WASHBUR CONC | 洗涤液 浓缩型（10×） 内含：Tris缓冲液，HCl，吐温，0.2%的NaN3 |
1×9× | PNPP SUBS | PNPP底物片 内含：对硝基苯磷酸（PNPP） |
1×27ml | PNPP BUF | PNPP底物缓冲液 即用，内含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN3 |
1×15ml | PNPP STOP | PNPP终止液 即用，内含：1M的NaOH，0.25M的EDTA |
1×20ml | HCl | HCl 即用，内含：0.1M的HCl |
3× | FOIL | 粘性金属板 |
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项目成果
