1. 固定及脱水
1.1 将处理好的干净的盖玻片,切割成 4~6 mm2 的小块。
1.2 将待检的较浓的大肠杆菌悬浮液滴加其上,或将菌苔直接涂上,也可用盖玻片小块粘贴菌落表面,自然干燥后置光学显微镜镜检,以菌体较密,但又不堆在一起为宜;
1.3 标记盖玻片小块有样品的一面;
1.4 将上述样品置于 1%~2% 戊二醛磷酸缓冲液(pH7.2 左右)中,于 4 ℃ 冰箱中固定过夜。
1.5 次日以 0.15% 的同一缓冲溶液冲洗,用 40%、70%、90% 和 100% 的乙醇分别依次脱水,每次 15 min。
1.6 脱水后,用醋酸戊脂置换乙醇。
2. 干燥 将上述制备的样品置于临界点干燥器中,浸泡于液态二氧化碳中,加热到临界点温度(31.4 ℃, 72.8 个大气压)以上,使之气化进行干燥。
3. 喷镀及观察 将样品放在真空镀膜机内,把金喷镀到样品表面后,取出样品在扫描电镜中进行观察。 展开 |