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观察植物细胞3D结构的新方法

2014.6.11

  最近,美国中田纳西州立大学(MTSU)的A. Bruce Cahoon博士及其同事,采用一种新方法观察植物细胞,他们将离子束的精度与电子束的成像能力相结合,在微米级分辨率放大图像。纳米元件科学家,使用聚焦离子束扫描电子显微镜(FIB-SEM)已经有几十年的时间,但直到最近,生物学家才开始探索它的性能。MTSU的研究人员首次对其性能进行优化,用于植物细胞成像。

  他们得到了漂亮的植物细胞器灰度图像。大的、深色的液泡被光线镶了一层边,椭圆形的叶绿体紧贴在厚厚的、光滑的细胞壁上。丰满的浆果状脂质体围绕在圆形细胞核的周围。内质网、蛋白体和其他独特形状的结构挤在一起,像细胞内的柔性瓷砖。当研究人员将开发出的方法用于拟南芥的种子、叶、茎、根和花瓣细胞类型作图时,也获得了极好的选图。Cahoon及其同事,将相关研究结果发表在2014年6月刊的《Applications in Plant Sciences》杂志。

  Cahoon解释说:“我们参加了在MTSU举办的一个关于FIB-SEM及其功能的开放展示,我们立即想到将其应用于植物组织观察。”离子束将样本切成薄片,每一片都被电子束捕获到一幅图像。100多份切片的图像,只有几纳米厚,研究人员将其结合起来,构建一幅细节丰富的三维图像。

  Cahoon说:“FIB-SEM某些方面是非常有吸引力的,但我们确实不得不退后一步,革新技术用于植物组织。”幸运的是,研究人员能够从FIB-SEM用于动物组织的工作中吸取经验。动物组织流程可作为基础,来修改特定的植物技术。

  Cahoon称:“只出现在二维视图中的亚细胞结构三维可视化,是非常令人满意的。有些组织就如同你所想象的那样,但是还有一些令人惊讶的组织,例如,花瓣细胞液泡中的无定形聚合物,在以前的电子显微镜研究中已经解散了。这些结构的三维视图显示出一个正常模式,出现在这项研究的几乎每一个花瓣叶肉细胞中。”

  电子显微镜产生的图像,放大倍数和分辨率比光学显微镜产生的图像更高,因为电子比可见光具有更短的波长。离子束能穿透组织样本,能以前所未有的精确度将样本切成薄片。将这两种技术结合起来,可以提供其他方法无法实现的独特图像。

  但是,所有美好的事物往往都有两面性,FIB-SEM也不例外。这个过程时间非常的密集,需要昂贵的专用仪器。组织样本必须经过高度特异性的固定程序,以固定它们用于电子显微镜成像,非导电的生物细胞需要一个导电涂层,例如铂或金合金。

  对于MTSU的研究小组来说,耗时的成像和昂贵的设备并没有白费,他们得到了很好的结果。“由内部结构的扩展视图所引起的新问题,还需要我们去解决,此外,既然我们知道如何使用这种技术,我们就可以开始扩大光合生物的种类,至少在最初阶段,探索它们的细胞结构。”

  开发用于种子、叶、茎、根和花瓣细胞类型成像的新FIB-SEM方法,将有助于扩大解剖学家了解细胞器性质、细胞和植物发育的现有工具。植物细胞内部的独特视图,可以揭示细胞器结构和分布的前所未有的一面。这项工作仅仅是科学领域中技术进步的一个例子,在这个例子中,材料科学为其他领域的研究人员打开了一扇新的大门。

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