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转基因作物叶片蛋白浓度测定过程基本介绍

2019.1.17

    转基因作物叶片蛋白浓度测定是判断作物是否存在转基因的有效手段,利用试纸条只需10分钟左右即可完成检测,其中大部分精力需要用在叶片组织样本的制备上,一般可分为四个步骤。第一,将植物叶片组织置于一次性组织提取管的盖子与管身之间,迅速盖住盖子,重复两次,得到2片圆形叶片组织。用杵将叶片置于提取管的底部。用记号笔在管壁做好标记;第二,将叶片充分捣碎;第三,加入 0.2 mL 样品缓冲液;第四,重复碾碎步骤使样品与缓冲液充分接触混合即可获得用于检测的样品。
    在样本制备完成后,接下来的操作就很方便了,只需等样本溶液恢复至常温,取出试纸条插入提取管,10分钟后即可完成转基因作物叶片蛋白浓度测定。其中主要应用了双抗体夹心法,首先将转基因蛋白特异的抗体.偶连于显色试剂,并掺人试纸条。当试纸条被插入含有转基因蛋白的样品的小量萃取物时,偶连抗体与蛋白之间就发生了结合,与偶连于显色试剂上的某些但不是全部抗体形成夹心物。膜片含有两个捕获区,一个捕获区可捕获结合的转基因蛋白,另一个捕获区可捕获显色试剂。当夹心物和未反应的显色试剂被膜片上的特定区捕获时,这些捕获区就显现出红色。若膜片上仅存在一条红色对照线,便说明受检样品为阴性样品.若存在两条线,便说明受检样品为阳性样品。
    用转基因检测试纸对转基因作物叶片蛋白浓度测定的最大优势还是体现在效率上,在很短时间内就能有效判断出作物中是否存在转基因,与传统聚合酶链式反应法相比,缩短了工作时间,提高了工作效率,不受场地限制,随时随地就能完成测试,不仅节约了检测成本,而且对环境也不会造成任何污染。


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