腺苷脱氨酶的检测方法介绍
第一代ADA测试
ADA将腺苷 （Adenosine） 脱氨产生次黄苷（Inosine） 和氨 （NH3）。一个ADA活性单位在测试特定条件下每分钟脱氨1μmole腺苷成为次黄苷。通过动态测量腺苷265nm处吸光度下降的速度，可以测算ADA的活性大小。Kaplan法 （1955） 由此建立。由于高底物浓度造成吸光度过高，该法仅适用于腺苷浓度低于40μM。如此低的底物浓度达不到底物饱和要求，造成ADA活性检测失真。因此，该法不适用于临床应用。
第二代ADA测试
原理为腺苷脱氨酶催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤核苷和氨。然后用Berthelot显色反应（1859）测定反应过程中产生氨的量，从而计算血清ADA活性单位。所需试剂易配制，仪器简单，但灵敏度低，易受外源性NH3影响，空白过高，不能直接测定红细胞ADA活性。
同样原因，ADA偶联谷氨酸脱氢酶（Glutamate Dehydrogenase， GLDH）反应：
通过测量340nm处NADPH吸光度下降的速度来测算ADA活性。该法也因血清含氨干扰，以及测试系统中过高NADPH造成非特异性氧化而无成算。
第三代ADA测试
Kalckar氏应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶（Purine nucleoside phosphorylase，PNP） 和黄嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase， XOD） 反应连续监测法。通过测量293nm处尿酸盐吸光度上升的速度来测算ADA活性。
但是，293nm时血清吸光度太高，造成临床应用不便。
第四代ADA测试
通过ADA偶联PNP，XOD，过氧化氢酶（Catalase）和醛脱氢酶（Aldehyde dehydrogenase），借助过氧化氢（H2O2）反应测量334nm处NADPH吸光度上升的速率来测算ADA活性。该法克服了以往ADA测试的困难，然而，鉴于试剂成本高，阻碍实际临床使用。
