植物组织培养所需仪器试剂
试剂
乙醇。
吲哚乙酸(IAA)或 2,4 – D(生长素类似物)。
氯化汞(升汞)或次氯酸钠。
6- 苄基氨基腺嘌呤(6-BA)
MS 培养基
0.1 mol/L NaOH与 0.1 mol/L HCl
配制培养基
(1)愈伤组织诱导培养基: MS 培养基(蔗糖含量为 10 g/L ,2,4 – D 含量为 2 mg/L,琼脂10 g/L)。
(2)试验培养基:在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA 。
吲哚乙酸(IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解, 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解,然后用蒸馏水稀释,再加入培养基中。
仪器设备
培养室,高压灭菌锅,水浴锅,解剖刀,三角烧瓶(100mL),烧杯,量筒,组培瓶,组培盖或封口膜,棉线,接种箱或超净工作台,分析天平,长镊子,枪状镊子,剪刀,容量瓶,移液管,牛皮纸。
培养基灭菌
将配好的培养基加入琼脂加热溶解,调至 pH 5.6~5.8,趁热分装于 100 mL组培瓶中,每瓶约 30 mL 。待培养基冷却凝固后,盖上组培盖,或盖上封口膜并用棉线扎牢,然后在高压灭菌锅中 121 ℃( 1 kg/c㎡)下灭菌 20 min 。取出组培瓶放在台子上,冷却后备用。接种操作所需的一切用具(如长镊子、解剖刀、剪刀等)及灭菌水,需同时灭菌。
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