胰岛素的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制,或2~4℃保存,48小时内使用供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含40单位的溶液。对照品溶液取胰岛素对照品适量,精密称定,加0.01mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1m中约含40单位的溶液系统适用性溶液取胰岛素对照品,加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1m中约含40单位的溶液,室温放置至少24小时色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(5~10pμm)以0.2mol/L硫酸盐缓冲液(取无水硫酸钠28.4g,加水溶解后,加磷酸2.7ml,乙醇胺调节pH值至2.3,加水至1000m)-乙腈(74:26)为流动相;柱温为40℃;检测波长为214nm进样体积20l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,胰岛素峰与A21脱氨胰岛素峰(与胰岛素峰的相对保留时间约为1.2)之间的分离度应不小于1.8,拖尾因子应不大于1.8。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以胰岛素峰面积与A2l脱氨胰岛素峰面积之和计算
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