试管或瓶中培养物的表现、可能原因及改进措施
培养阶段 | 培养物的表现 | 症状产生的可能原因 | 可供选择的改进措施 |
|---|---|---|---|
初代培养阶段启动与脱分化 | 培养物水浸状、变色、坏死，茎段面附近干枯 | 表面灭菌剂浓度过高，时间过长；外植体选用部位不当；时期不当 | 试用较温和灭菌剂，降低浓度，减少时间；试用其他部位，改在生长初、中期采样 |
培养物长期培养没有多少反应 | 生长素种类不当；用量不足；温度不适宜；培养基不适宜 | 增加生长素用量，试用2,4-D；调整培养温度 | |
愈伤组织生长过旺，疏松，后期水浸状 | 生长素及细胞分裂素用量过多；培养温度过高；培养基渗透势低 | 减少生长素、细胞分裂素用量，适当降低培养温度 | |
愈伤组织生长过紧密、平滑或突起，粗厚，生长缓慢 | 细胞分裂素用量过多；糖浓度过高；生长素过量亦可引起 | 适当减少细胞分裂素和糖的用量 | |
侧芽不萌发，皮层过于膨大，皮孔长出愈伤组织 | 采样枝条过嫩；生长素、细胞分裂素用量过多 | 减少生长素、细胞分裂素用量，采用较老化枝条 | |
继代培养阶段再分化与丛生芽苗增殖 | 苗分化数量少、速度慢、分枝少，个别苗生长细高 | 细胞分裂素用量不足；温度偏高；光照不足 | 增加细胞分裂素用量，适当降低温度 |
苗分化较多，生长慢，部分苗畸形，节间极度短缩，苗丛密集，过度微型化 | 细胞分裂素用量过多；温度不适宜 | 减少细胞分裂素或停用一段时间，调节适当温度 | |
分化出苗较少，苗畸形，培养较久苗可能再次愈伤组织化 | 生长素用量偏高，温度偏高 | 减少生长素用量，适当降温 | |
叶粗厚变脆 | 生长素用量偏高，或兼有细胞分裂素用量偏高 | 适当减少激素用量，避免叶接触培养基 | |
再生苗的叶缘、叶面等处偶有不定芽分化出来 | 细胞分裂素用量过多，抑或该种植物适宜于这种再生方式 | 适当减少细胞分裂素用量，或分阶段利用这一再生方式 | |
从生苗过于细弱，不适合生根操作和移栽 | 细胞分裂素过多，温度过高，光照短，光强不足，久不转接，生长空间窄 | 减少细胞分裂素用量，延长光照，增加光强，及时转接继代，降低接种密度，改善封口条件 | |
常有黄叶、死苗夹于丛生苗中，部分苗逐渐衰弱，生长停止，草本植物有时水浸状、烫伤状 | 瓶内气体状况恶化；pH值变化过大；久不转接糖已耗尽，光合作用不足自身维持；瓶内乙烯含量升高；培养物可能已污染；温度不适 | 部分措施同上。去除污染，控制温度 | |
幼苗生长无力，陆续发黄落叶，组织水浸状、煮熟状 | 部分原因同上。植物激素配比不适，无机盐浓度不适等 | 部分措施同上。及时继代，适当调节激素配比 | |
幼苗淡绿，部分失绿 | 忘加铁盐或量不足；pH值不适，铁、锰、镁元素配比失调，光过强，温度不适 | 仔细配制培养基，注意配方成分，调好pH值，控制条件 | |
诱导生根阶段 | 培养物久不生根，基部切口没有适宜的愈伤组织生长 | 生长素种类不适宜；用量不足；生根部位通气不良；基因型影响，生根程序不适当；pH值不适；无机盐浓度及配合不当 | 改进培养程序，选用或增加生长素用量，改用滤纸桥液培生根 |
愈伤组织生长过大过快，根部肿胀或畸形，几条根并联或愈合；苗发黄受抑制或死亡 | 生长素种类不适；用量过高；或伴有细胞分裂素用量过高；程序不适等 | 减少生长素或细胞分裂素用量，改进培养程序等 |
