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转导在细菌遗传学研究中的应用

2022.11.22

应用转导是细菌的遗传学研究中的一种常用研究手段。它可以用来在细菌间转移基因,进行互补测验,进行基因定位,特别是通过共转导方法进行基因的精细结构分析。在遗传工程中可以把所要克隆的基因通过重组DNA技术插入到λ噬菌体的DNA中,然后通过离体包装方法把它用噬菌体外壳蛋白包装起来,再去感染寄主细胞以制备基因文库。

转导实验中常用的是 λ 噬菌体,它能整合在大肠杆菌染色体 DNA 上的半乳糖基因 (gal.17 分钟处 ) 与生物素基因 (bio.18 分钟处 ) 之间,因此,它能转导 gal 基因又能转导 bio 基固。选用溶源性的 E.coliK12 ( λ) gal + 为供体菌。由于在此供体菌中 λ噬菌体 与 gal + 基因 紧密连锁,因此,当此供体菌受紫外线照射后产生裂解反应,噬菌体被诱发释放,以一定的比例形成带有 gal 基因的转导噬菌体。当让这种转导噬菌体与受体菌 E.coliK12S gal - 混合接触时,带有供体菌 gal + 基因的转导噬菌体能以一定的频率整合到受体菌的染色体 DNA ,而使不能利用半乳糖的 gal - 受体菌转变成了能利用半乳糖的 gal + 细菌。


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