植物中硝酸盐含量的测定注意事项
植物体内硝态氮含量的测定 一、试剂 1.硝氮-N 标准溶液 500μ g 氮/mL 精确称取 0.7221g 烘干至恒质量的 KNO3 溶于去离子水 中,定容至 200mL。 2.5%水杨酸-硫酸溶液 称取 5g 水杨酸溶于 100mL 浓硫酸中(相对密度 1.84),搅拌溶解 后,贮于棕色瓶中,置冰箱保存一周有效。 3.8%氢氧化钠溶液 称取 20g 氢氧化钠溶于 250mL 去离子水中。 二、实验步骤 1.标准曲线的制作 (1)吸取 500μ g/mL NO3--N 标准溶液 1 mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL、12mL 分 别放入 50 mL 容量瓶中,用去离子水定容至刻度,使之成 10μ g/mL、20μ g/mL、40μ g/mL、 60μ g/mL、80μ g/mL、100μ g/mL、120μ g/mL NO3--N 的系列标准溶液。 (2)吸取上述系列标准溶液 0.1 mL,分别放入刻度试管中,以 0.1 mL 去离子水代替标准溶 液做空白。 再分别加入 0.4 mL 5%水杨酸-硫酸溶液,摇匀,在室温下放置 20min 后,再加 入 8% NaOH 溶液 9.5 mL,摇匀冷却至室温。 显色液总体积为 10 mL。 (3)以空白做参比,在 410nm 波长下测定吸光度。 以 NO3--N 浓度做横坐标(x),吸光度 为纵坐标(y),绘制标准曲线并计算出回归方程。 2.样品中硝酸盐的 测定 (1)样品液的制备 取一定量的植物材料剪碎混匀。 精确称取 2~3g 3 份,分别放入 3 支刻 度试管中,加入 10 mL 去离子水,用玻璃珠封口,置入沸水浴中提取 30min 后取出,用自 来水冷却,将提取液过滤到 25 mL 容量瓶中,并反复冲洗残渣。 最后定容至刻度。 (2)样品液的测定 吸取样品液 0.1 mL 分别于 3 支刻度试管中,然后加入 5%水杨酸-硫酸 溶液 0.4 mL,混匀后置室温下 20min,再慢慢加入 9.5 mL 8% NaOH 溶液,待冷却至室温后, 以空白做参比,在 410nm 波长下测其吸光度。 三、结果计算 样品硝态氮含量(μ g/g)=x×VT÷(W×VS) 其中:x 为由回归方程计算出的 NO3--N 浓度(μ g/mL);VT 为样品定容体积(mL); W 为样品质量(g);VS 为测定取用的样品提取液体积(mL)。
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