胰岛素测定实验
实验材料 胰岛素标准品125 I－胰岛素
试剂、试剂盒 抗血清第二抗体PBS正常兔血清
仪器、耗材 计数仪试管加样器离心机
实验步骤
一、材料及试剂
1. 胰岛素标准品(不同浓度的)
2、125 I－胰岛素
3、抗血清
4、第二抗体
5、分析试剂 为0.05 mol/L pH7.4 PBS液＋1%正常兔血清。
6、计数仪
7、试管、加样器、离心机等
二、操作方法
1. 按表进行。
2. 测定和计算反应完毕后，将各管于室温3 000 r/ min离心30 min，仔细吸取上清液，收集于放射性废液贮存容器内。用－计数仪分别测量各管沉淀物（B）的放射性强度（cpm），以两管的cpm均值表示。再以第1，2管的cpm值为Bo，分别计算结合率（B%，即B/Bo×100%），用B%为纵坐标，不同浓度胰岛素标准品为横坐标，绘制标准曲线。然后根据待检管的B%，从标准曲线中即可查得胰岛素的相应含量。
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