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微量加样器的质量控制

2019.5.18

   微量加样器是微量酶免疫测定中加样时必用的设备,其使用和校准对酶免疫测定结果有直接的影响,以下对如何正确地使用微量加样器及其校准等进行介绍:

       1. 加样器的使用

       1.1 吸液 标准吸液步骤如下:

       1.1.1 把按钮压至第一停点;

       1.1.2 垂直握持加样器,使吸头浸入液样中,浸入液体深度视型号而定(见附表)

       不同加样器允许浸入液体深度

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       1.1.3 缓慢、平稳地松开按钮,吸液样。等一秒钟,然后将吸头提离液面。用药用吸纸抹去吸嘴外面可能附着的液滴,小心勿触及吸头口。

       1.2 放液

       1.2.1 将吸头口贴到容器内壁并保持10-40倾斜。

       1.2.2 平稳地把按钮压到第一停点。第一秒钟后再把按钮压至第二停点以排除剩余液体。

       1.2.3 压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁察过。

       1.2.4 松开按钮。

       1.2.5 按吸头弹射器除去吸头(只有改用不同液体时才需要更换吸头)。

       1.3 预洗 当装上一个新吸头(或改变吸取的容量值)时应预洗吸头,先吸入一次液样并将之排回原容器中。预洗新吸头能有效提高移液的精确度和重现性。这是因为第一次吸取的液体会在吸头内壁形成液膜,导致计量误差。而同一吸头在连续操作时液膜相对保持不变,故第二次吸液时误差即可消除。

       1.4 致密及粘稠液体的吸取 对于密度高于水的液体,可将容量计的读数调到低于所需值来进行补偿。例如:用P20移液器转移10ml血清。先将读数调到10ml,吸取后以重量法测定。如实测体积为9.5ml,即偏差0.5ml并重复一次。如第二次测定仍不够准确,根据偏差再作调整。排放致密或粘稠液体时,宜在第一停点多等一二秒钟再压到第二停点。

1.5 加样器吸头 加样器吸头是整个移液系统的有机组成部分,对其基本要求是,必须有高机械、热力学和化学稳定性,且纯度高,生产过程纯净,无有机或化学物质(如染料)和重金属污染。选择密封良好的环口、薄壁和嘴口尖细的吸头,将使得在加样时,吸头的安装或卸脱更加容易。吸头管壁有弹性,加样吸液时不会产生旋涡,如此加样的精度就更高。吸头嘴口无毛刺,表面光洁平滑,使得其沾湿性极小,可避免液体留外壁引起的误差。吸头应与加样器上吸头套筒密封完好,可防止由于空气泄漏而造成加样精度或准确度的误差。此外,吸头还应有液体容积刻度线。D200吸头在20ml和100ml处有标记;D1000吸头在300ml处有标记,D10吸头在2ml处有标记。最后,吸头应可在121℃1Pa压力下消毒20min。如果在使用加样中,想绝对避免样品与样品、样品与加样器或样品与操作人员之间的污染,建议使用Diamond带滤芯吸头。Diamond带滤芯吸头可以经高温消毒,其内置滤芯不会损坏。

       2. 加样器的校准

       加样器容量性能的鉴定,可依据国际标准化组织(ISO)文件ISO/DIS8655和国家技术监督局颁发的有关定量、可调移液器的中华人民共和国国家计量检定规程《定量、可调移液器试行检定规程》(JJG646-90)规定的重量测试方法。这是目前用于此类仪器有效的校准方法。

       加样器校准标准操作规范

       2.1 适用加样器范围 各种品牌、型号的固定、可调和多通道加样器。

       2.2 校准环境和用具要求

       2.2.1 室温20-25℃,测定中波动范围不大于0.5℃。

       2.2.2 电子天平:放置于无尘和震动影响的台面上,房间尽可能有空调。称量时,为保证天平的湿度(相对湿度60%-90%),天平内应放置一装有10ml蒸馏水的小烧杯。

       2.2.3 小烧杯:5-10ml体积。

       2.2.4 测定液体:温度为20-25℃的去气双蒸水。

       2.3 选定校准体积 ①拟校准体积;②加样器标定体积的中间体积;③最小可调体积(不小于拟校准体积的10%)。如为固定体积加样器,则只有一种校准体积。

       2.4 校准步骤

       2.4.1 将加样器调至拟校准体积,选择合适的吸头。

       2.4.2 调节好天平。

       2.4.3 来回吸吹蒸馏水3次,以使吸头湿润,用纱布拭干吸头。

       2.4.4 垂直握住加样器,将吸头浸入液面2-3mm处,缓慢(1-3s)一致地吸取蒸馏水。

       2.4.5 将吸头离开液面,靠在管壁,去掉吸头外部的液体。 

2.4.6 将加样器以30角放入称量烧杯中,缓慢一致地将加样器压至第一档,等待1-3s,再压至第二档,使吸头里的液体完全排出。

       2.4.7 记录称量值。

       2.4.8 擦干吸头外面。

       2.4.9 按上述步骤称量10次。

       2.4.10 取10次测定值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量,按蒸馏水在不同温度及气压下的重量与体积的换算因子计算体积。然后,按校准结果调节加样器。

       2.5 加样器的维护保养程序

       加样器应根据使用频率进行维护,但至少应每3个月进行一次,具体方法如下:

       2.5.1 一般维护可用中性洗涤剂清洁,或者用60﹪的异丙醇,然后用蒸馏水反复洗涤,去除洗涤剂或异丙醇,晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。

       2.5.2 如果有液体进入加样器内的严重污染,可将加样器拆开后进行清洁,具体拆开步骤参照加样器说明书。

       2.5.3 高压消毒,有的加样器的吸管部分可高压消毒,但需注意的是消毒时不可超温超时,也不能挤压放置,以免造成变形。

       2.5.4 可调式移液器在不使用时应妥善地竖立放于支架上,远离潮湿及腐蚀性物质。

       2.5.5 在移液操作过程中为防止液体进入加样器套筒内,必须注意:压放按钮时保持平稳;加样器不得倒转;吸头中有液体时不可将加样器平放。

       2.5.6 每天开始工作之前应检查移液器的外表面是否有灰尘或污物,若有则小心抹去。

 


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