单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳（图）（二）
（二）人血清中IgG正常值的测定：
1．将已制备好的抗体琼脂板置打孔模板上，每一琼脂板可打孔4个（孔径3mm，孔距10mm）。
2．将单位正常人血清用PBS分别作1/50稀释。
3．用微量加样器分别取1/50稀释的单人份血清标本10µl加入孔中，每份标本应各加两孔。
4．作好标记放湿盒中，置37℃温箱，24小时后观察结果。
四、实验结果
测量各份标本的沉淀环直径并记录结果，然后用标准曲线测出每份标本所含IgG的量（U/ml），并换算为mg/ml。统计全实验室实验结果并计算出均值，写出较完整的实验报告。
单向免疫扩散示意图
五、注意事项
1．在制做标准曲线时，为尽量减少误差，至少应做两份以上标准板。
2. 加样时，吸取每份标本均应更换塑料吸头。
（二） 双向免疫扩散（Double immunodiffusion）——抗原分析
一、基本原理
双向免疫扩散是指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散,彼此相遇后形成一定类型的特异性沉淀线。沉淀线的特征与位置不仅取决于抗原抗体的特异性及相互间比例，而且与其分子大小及扩散速度相关。当抗原、抗体存在多个系统时，可呈现多条沉淀线乃至交叉反应。依据沉淀线的形态、条数、清晰度及位置可了解抗原或抗体的若干性质，如浓度、特异性等。
二、实验材料
1%琼脂（生理盐水配制）管，每管约4ml
载玻片
打孔器及打孔模板
微量加样器及塑料吸头
抗原：0.5µg/ml牛血清白蛋白（BSA）、0.5µg/ml人血清白蛋白（HSA）
抗体：兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋白
湿盒
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