脐血来源多能祖细胞(CB-MNCs)的冻存与复苏实验
CB-MNCs冻存
CB-MNCs的复苏
实验方法原理 | |
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实验材料 | CB-MNCs |
试剂、试剂盒 | FBS 二甲基亚砜(DMSO) |
仪器、耗材 | 冻存管 慢速冷冻盒(如Mr.Frosty程序降温盒)或控速降温仪 耐液氮储存盒 |
实验步骤 | (a)准备冻存液:90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却,至少30min。 (b)CB-MNCs细胞计数。 (c)用冷的冻存液重悬细胞,调整细胞浓度为(5〜l0) ×106活细胞/mL。 (d)按1mL/冻存管分装。 (e)立即将冻存管放入慢速冷冻盒,置于-70℃冰箱4〜24h。或者将冻存管放入液氮的控速降温仪中。 (f)4〜24h后,将置于-70℃冰箱或控速降温仪中的冻存管放入耐液氮储存盒,将此盒放入液氮罐的气相(大约-135℃)或液相(大约-196℃)中。 |
注意事项 | |
其他 |