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脐血来源多能祖细胞(CB-MNCs)的冻存与复苏实验

2019.11.12
  • CB-MNCs冻存

  • CB-MNCs的复苏

实验方法原理
实验材料

CB-MNCs                                                          

试剂、试剂盒

FBS                                                                  二甲基亚砜(DMSO)                                                          

仪器、耗材

冻存管                                                                  慢速冷冻盒(如Mr.Frosty程序降温盒)或控速降温仪                                                                  耐液氮储存盒                                                          

实验步骤

(a)准备冻存液:90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却,至少30min。


(b)CB-MNCs细胞计数。


(c)用冷的冻存液重悬细胞,调整细胞浓度为(5〜l0) ×106活细胞/mL。


(d)按1mL/冻存管分装。


(e)立即将冻存管放入慢速冷冻盒,置于-70℃冰箱4〜24h。或者将冻存管放入液氮的控速降温仪中。


(f)4〜24h后,将置于-70℃冰箱或控速降温仪中的冻存管放入耐液氮储存盒,将此盒放入液氮罐的气相(大约-135℃)或液相(大约-196℃)中。

注意事项
其他


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