抗红细胞抗体(溶血素)的制备
实验概要
抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践，为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后，动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义，而且对器官移植，肿瘤以及某些科研工作也有重要意义。
抗体的产生通常与抗原的质和量、动物种类以及接种途径有密切关系。因此在制备免疫血清时要根据抗原的不同选择适宜的动物种类和免疫方法。
主要试剂
无菌生理盐水，保存液(阿氏液)等
主要设备
冰箱，高速离心机，注射器等。
实验材料
1． 动物：家兔
2． 红细胞悬液
实验步骤
1. 红细胞悬液的制备
1) 采血
采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合，置冰箱中，可保存数周，也可用抗凝方法
2) 洗涤血球
先将抗凝血液离心沉淀(2000cpmⅹ5分钟)吸去上清。加入2—3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹打混匀，离心沉淀5分钟，吸去上清液。如此连续洗3次，最后一次可离心沉淀10分钟以使血球密集管底。直至上清液透明无色再吸去上清夜，留密集血球备用。洗涤4次则血球变脆不适于使用。
3) 用生理盐水将红血球配成需要浓度，即为试验用的血球悬液。如需10%血球悬液时，则吸取1毫升洗涤后的红血球加生理盐水9毫升即成。
2. 免疫方法
1) 选择2—3千克健康雄兔，按如下剂量及程序免疫：
日期剂量(毫升)途径
第1天全血 0.5皮内
第3天全血 1.0皮内
第5天全血 1.5皮内
第7天全血 2.0皮内
第9天全血 2.5皮内
第12天 20%红细胞悬液全血 1.0静脉
第15天 20%红细胞悬液全血 .0静脉
2) 末次注入后7天，耳静脉采血1毫升，滴定血液单位达1：2000以上可颈动脉放血，分离血清，放等量甘油防腐，分装无菌安瓶，贮于4℃中备用。
