酶切电泳条带拖尾的原因
建议你做如下改进：
1.原始质粒上样2ul,电泳检测,确定质粒质量没问题；
2.所有酶切体系均改为10ul,其中质粒2ul,酶0.1ul （双酶切时另一种酶也加0.1ul ）,buffer终浓度为 1×,剩下为去离子水.酶切时间为4小时左右.
3.电泳用的凝胶最好为新鲜配制的,浓度视质粒大小而定,一般为1%；
电泳的缓冲液最好也是新鲜配制的,电泳电压适当.
1KB的条带拖尾严重,可能是凝胶不新鲜,或者是电泳时电压过高,或者是酶切时间过长.上述建议中已经给出解决方法.
至于你说的奇怪现象,可能质粒已经降解,也可能是酶切过久导致降解,也可能是枪头或者离心管等器材污染,总之保证一切是新鲜的,再做一次.
推荐
