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如何选购一款适合自己的PCR仪?

2018.11.02

1、 仪器的检测通量

如果进行一般的基因表达研究或病原体检测,实在不必购买昂贵的仪器,96孔的通量足够用;

如果需要寻找要新药靶点和疾病标记的实验室可以考虑购买384孔板的仪器。

假如经费有限无法购买384孔板仪器的实验室,可以考虑购买运行速度快(带有FAST模块)的96孔板荧光定量PCR仪。

2、 硬件设计特点

荧光定量PCR仪主要有传统的96孔板式、创新的离心式等,每种设计都有它的独到之处但也都有无法避免的缺点。

然而不用着急,随着荧光定量PCR技术的使用,聪明的仪器生产商纷纷在传统的96孔板仪器上大作改进。

Eppendorf 公司推出的Mastercycler ep realplex是一款带有梯度功能的荧光定量PCR仪,使用了96个LED为激发光源,采用先进的CPM(第二代PMT)及96合一光纤为检测系统,不但避免了边缘效应还保证所有样品间的荧光信号没有干扰。

3、 运行速度

在荧光定量PCR仪的众多技术参数中,升降温速度也是厂家喜欢大力宣传的指标。

更快的升降温,可以缩短反应进行的时间,而且缩短了可能的非特异性结合、反应的时间,提高PCR的特异性。

为了更好的完成实验,各个厂家纷纷推出能快速运行的荧光定量PCR仪。例如ROCHE推出的LightCycler 480,可在半小时左右完成30-40个循环。

ABI的7500可以选配FAST模块拥有5°C/秒的升降温速度,可在40分钟左右完成30-40个循环。

最近eppendorf新推出的Mastercycler ep realplex4S 和2S的银质模块荧光定量PCR仪 ,升降温的速度可达到6℃/秒和4.5/秒,只需运行28分钟就可以完成在其他仪器上需要40~60min的PCR反应。

4、 灵活性

大规模繁忙的实验室设备固然让人羡慕,但是常规实验室同样可以有精彩的选择。现在的仪器供应商拥有众多技术专家,有的还能提供整个分子生物学的基础研究平台,不段了解、满足您现在的需求,而且还考虑到了你可能变化的需求——升级和更换模块。Bio-rad的Mycycler就可以选择模块升级为定量PCR仪。ABI的7900可以选择将96孔槽变为384孔槽。

像离心式的双通道的Rotor-gene3000A 就可以根据您研究的需要升级成四通道的荧光定量PCR仪。Eppendorf公司在这方面考虑的就更加周全,如实验室已经拥有Mastercycler ep可以按照您的要求升级为Mastercycler ep realplex荧光定量PCR仪,而且可升级的型号有4种:2通道银质、铝制模块和4通道银质、铝制模块。您可以根据自己的经费和实验需要购买、升级任何一款Mastercycler ep realplex荧光定量PCR仪。

5、讲真,其实你没必要那么累

古语有云,“磨刀不误砍柴工”,挑选仪器是一件苦差事。可是,时间有限,世界上有那么多仪器,即使不停地搜索仪器知识,能了解的数量也十分有限。这种情况下就不得不学着做一些筛选,通过一些技巧和方法,最终提升自己的效率。

难道为了找一台适合自己的荧光定量PCR仪,不懂原理?没事,搜!不懂如何保养?没事,搜!结果,天天研究,挤占了时间不说,最终找来的仪器可能还不尽如人意。


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