分光光度法测定山梨酸（钾）含量
1、测定原理
提取样品中山梨酸及其盐类,经硫酸重铬酸钾氧化成丙二醛,再与硫代巴比妥酸形成红色化合物,其颜色深浅与丙二醛含量成正比,可于530nm处比色定量。
2、试剂
(1)重铬酸钾硫-硫酸溶液:0.1mol/L重铬酸钾与0.15mol/L硫酸以1:1混合备用。
(2)硫代巴比妥酸溶液:准确称取0.5g硫代巴比妥酸于100mL容量瓶中,加20mL水,加10mL1mol/L氢氧化钠溶液,摇匀溶解后再加1mol/L盐酸11mL,以水定容(临时用配制,6h内使用)。
(3)山梨酸钾标准溶液:准确称取250g山梨酸钾于250mL容量瓶中,用蒸馏水溶解并定容(本溶液山梨酸含量为1mg/mL,使用时再稀释为0.1mg/mL)。
3、仪器
分光光度计;组织碎机;10mL比色管。
4、操作方法
(1)样品处理 称取100g样品,加200mL水于组织捣碎机中捣成匀浆。称取匀浆100g,加水200mL继续捣1min,称取10g于20mL容量瓶中定容,摇匀,过滤备用。
(2)标准曲线绘制 吸取0.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0mL,8.0mL、10.0mL山梨酸钾标准溶液于250mL容量瓶中,用水定容。分别吸取2.0mL于相应的10mL比色管中,加2mL重铬酸钾硫酸溶液,于100℃水浴中加热7min,立即加入2.0mL硫代巴比妥酸,继续加热10min,立刻用冷水冷却,于530nm处测吸光度,绘制标准曲线。
(3)试样测定 吸取式样处理液2mL于10mL比色管中,按标准曲线绘制操作,于530nm处测吸光度,以标准曲线定量。
5、结果计算
式中 X1——山梨酸钾含量,g/kg;
X2——山梨酸含量,g/kg;
c——试液中含山梨酸钾的浓度,mg/mL;
m——称取匀浆相当于试样质量,g;
1.34——山梨酸与山梨酸钾之间的换算系数;
250——样品处理液总体积,mL;
2——用于比色时试样溶液的体积,mL。
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