实验室分析仪器--色谱柱柱再生办法
色谱柱使用一段时间后，柱效将会下降，必须进行再生处理。再生处理包括活化（自右向左）和净化（自左向右）两种。对不同的填料处理方法不同，同一种填料也可以采用不同的处理方法。硅胶、氧化铝和极性（正相）键合相色谱柱可以采用以下程序再生:三甲基戊烷或己烷三氯乙烷→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水，采用上述溶剂依次以1 ml/min的流速通过色谱柱，洗脱量约为20ml。然后反方向重复上述过程。
反相色谱柱常用甲醇—水或乙腈—水作流动相，有时还可能含有控制pH值的盐、酸或离子型溶剂。对硅胶或以硅胶为基质的键合（或离子交换）填料，为避免硅胶溶解，pH值不应超过8.5。再生时将25ml纯甲醇及25ml甲醇—氯仿（1:1）混合液依次通过色谱柱淋洗，然后用所选的流动相平衡。
离子交换色谱柱的再生方法有两种:①先用25m蒸馏水通过柱子以除去所有的缓冲盐类:然后采用25ml甲醇冲洗柱子，以除去由于分配效应而残存在骨架中的杂质；再用25m蒸馏水除去不溶于甲醇的残存盐类:最后用缓冲液平衡。②先用0.1mol/L的柠檬酸洗涤；然后用水洗涤（不要用碱性溶液，以防硅胶基质溶解）；最后用缓冲液平衡。
如果柱头被污染，可以在出口处用输液泵反相压入溶剂，通常选用有一定黏度的溶剂（如甘油-水或水-甲醇），将填料从内慢慢推出少许，停泵，切除柱头已污染的填料，放入烧杯中清洗后，再重新装填，测定柱效至达到要求。
常见色谱柱再生用溶剂及其顺序见表5，带金属抗衡离子的聚合物色谱柱的再生方法见表6。
常见色谱柱再生用溶剂及顺序
固定相类型 | 再生溶剂及顺序 |
正相固定相 | 用四氢呋喃冲洗；甲醇冲洗；四氢呋喃冲洗；二氯甲烷冲洗；无苯正己烷冲洗 |
反相固定相 | 用HPLC级水冲洗，在冲洗过程中加入4等份200μl的二甲亚砜（DMSO）；依次用甲醇、氯仿、甲醇冲洗 |
阴离子交换固定相 | 依次用HPLC级水、甲醇、氯仿冲洗 |
阳离子交换固定相 | 用HPLC级水冲洗，在冲洗过程中加入4等份200μl的DMSO；四氢呋喃冲洗 |
蛋白质凝胶固定相 | 去除蛋白质尺寸排阻介质中的污染物有两种清洗/再生的方法：①弱保留蛋白质，用30mol/LpH=3.0的磷酸盐缓冲液冲洗；②强保留蛋白质，用100%的水到100%的乙氰梯度洗脱60min |
带金属抗衡离子的聚合物色谱柱的再生方法
色谱柱类型 | 金属污染物 | 有机污染物 | 色谱柱清洗 |
氢离子型 | 用25℃的0.1mol/LH2SO4溶液以0.1ml/min的流速反向洗4~6h | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗 4h | 用65℃的20：80的乙氰0.01mol/LH2SO4溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h |
钙离子型 | 用25℃的0.1mol/LpH=6.3的Ca(NO3)2溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4~16h | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h |
钠离子型 | 用85℃的0.1mol/L的NaNO3溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4~16h | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h |
银离子型 | 没有再生过程报道 | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h |
铅离子型 | 用85℃的0.1mol/LpH=3.3的Pb(NO3)2溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4~16h | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h | 用25℃的20：80的乙氰水溶液以0.1ml/min的流速反向冲洗4h |
