Thorlabs多光子显微镜基本套件及应用
MPM-2PKIT多光子基本套件是Thorlabs公司为想要自己搭建多光子成像系统的研究人员提供的解决方案，在量身定制的同时又不牺牲成像的性能。该套件包含一个模块化多光子成像系统所必须的核心部件，为特定应用而配置。此外，该系统无需传统显微镜，即可以对大样品，如整个活体生物等进行成像，并且该设计减小了其在工作台上占据的体积。 MPM-2PKIT 基本套件是由MPM200-2多光子成像系统衍生而来的，但该套件以组件形式存在。该套件包含一个扫描头、一个近红外（NIR）扫描和套筒透镜配件、一个初级分色镜模块、一个作为二次分色和发射滤光的滤光片模块、两个高灵敏度GaAsP光电倍增管和图像采集电路及软件。多光子显微镜基本套件的外观如图1所示。
图1 多光子显微镜基本套件 本系统的光路图如图2所示
图2 多光子显微镜套件光路图 多光子显微镜系统在生物学领域的一个成功实例是活体细胞成像。多光子显微技术非常适合于样品需要长时间成像的活体细胞研究。其高速扫描特性减少了在活体细胞成像过程中的光漂白效应，这对于细胞成像是很有利的。Thorlabs公司的多光子系统通过一个扫描振镜对实现高速扫描。该系统还采用近红外双光子激发效应，促进了样品的深度渗透，将光漂白效应最小化，与单光子激发技术相比降低了光学毒性。多光子显微技术已经成功用于追踪GFP标记的细胞和细胞结构，如C.Elegens线虫中的G蛋白受体，见图3。
图3 C.Elegens线虫中的G蛋白受体成像 实时活体肾血流动的灌注检测也是一个例子，两个通道使用一个Olympus 20X 1.0 NA物镜以30帧/秒（512*512分辨率）同时进行图像采集。血液与葡萄糖（血浆，绿色）和1微米荧光微球的混合物一起灌注。在血管中我们追踪两个独立的微球（A和B）。后续帧之间的高瞬时分辨率保证了各微球更精确的速度测量。在绿色的血浆之中我们还可以观察到一些暗色物体，这些暗色物体是红细胞，这样就为血液流动分析提供了额外的依据。 
图4 实时活体肾血流动的灌注检测
