过氧化物酶(POX)染色
实验原理
血细胞中的过氧化物酶(Peroxidase,POX或MPO)能分解试剂中的底物H2O2，释出新生态氧，使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺，后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒，沉着于细胞质中。
实验方法
材料：
1.1%TMB
2.亚硝基铁氰化钠饱和溶液
3.1%过氧化氢溶液
4.稀过氧化氢溶液
5.瑞氏染色液
6.新鲜涂片(骨髓或者血片)、染色架、显微镜等
方法：
1.取0.1%TMB乙醇溶液lml，加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10?l，溶液呈淡棕黄色。
2.在新鲜干燥的血片上，加混合溶液0.5ml，放置lmin后，再加稀过氧化氢溶液0.7ml，染色6min。
3.自来水冲洗，待干，瑞氏染液复染15～20min。
4.自来水冲洗，待干，油镜镜检。
实验结果计算
细胞质内有蓝黑色颗粒者为阳性。
（－）无颗粒沉着；
（±）颗粒细小，分布稀疏；
（+）颗粒较粗，局灶分布；
（++）颗粒粗大，分布较密，占胞质1/2~2/3；
（+++）颗粒粗大，呈团块分布，几乎布满胞质；
（++++）全部胞质均布满颗粒，可覆盖胞核。
注意事项
1.血涂片和骨髓片应该新鲜制作，涂片应该厚薄适宜；
2.TMB配置在85%~88%的乙醇溶液中效果较好，勿用90%~95%乙醇，否则细胞表面蛋白质很快凝固，妨碍试剂向胞内渗入而导致染色效果差；
3.H2O2需新鲜配置，其浓度与加入量不能随意更改。涂片中粒细胞看不见颗粒，红细胞呈棕色或者绿色，即表示H2O2过浓。若H2O2加于玻片上无气泡，则表示无效；
4.染色液pH为5.5；
5.试剂应置于低温暗处，防止应光线照射而失效。
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