过氧化物酶染色实验原理
过氧化物酶是广泛存在于生物体中的一类酶，大部分含有血红素，是一种结合蛋白。它可以催化H2O2或相关有机过氧化合物与有机、无机化合物的氧化反应。血细胞所含过氧化物酶主要为髓过氧化物酶（MPO），MPO是一类糖蛋白，是人类中性粒细胞含量最多的蛋白质，约占细胞干重的3%～5%.用MPOPHMPZE探针与正常人染色体中期细胞作原位杂交，证明MPO基因定位在染色体17q11～q22，为单拷贝基因。对HL60细胞系中MPO的生物合成和加工过程研究发现，最初产生的MPO是分子量为89，000的前体，有大、小亚单位各一个，对内糖苷酶敏感，无MPO活性，MPO前体还需进一步进入溶酶体，经蛋白切割后才能成熟并具有活性。这提示MPO前体转录时或转录后的加工缺陷可产生异常的MPO，使后者在早幼粒细胞发育过程中不能包装到嗜苯胺蓝颗粒中。在临床白血病研究中，用全长MPOcDNA作探针进行RNA印迹法杂交，或用MPOcDNA探针作反转录聚合酶链反应（RT-PCR）或用原位杂交，证明AML表达MPOmRNA，但ALL无一表达MPOmRNA.在早期原始细胞尚无颗粒时可在核膜、内质网上发现其阳性物，此时在光镜下则难以识别出来，用电镜可观察到部分细胞显示阳性。髓过氧化物酶是嗜天青颗粒中一种溶酶体酶，主要存在于线粒体和溶酶体中，主其能是破坏生物氧化过程中有巨毒的过氧化物，使其放出氧，参加细胞内氧化还原过程，是一种与生物氧化有关的重要酶类。
1985年血液学国际标准化委员会（ICSH）推荐三种方法：二氨基联苯胺法（DAB染色法）；过氧化酶氨基-甲基卡巴唑染色法；二盐酸联苯胺法。二氨基联苯胺染色是常用的方法，细胞颗粒中的过氧化酶，能将过氧化氢中的氧释放出来，氧化二氨基联苯胺（DAB），形成金黄色沉淀而定位于过氧化酶活性的部位。
