血清醛缩酶(ALD)检查方法
酶偶联法:
①取2.5ml底物缓冲液,0.05ml NADH溶液,0.01ml GDH/TPL/LDH混合酶液,0.2ml血清或血浆,放入比色杯中。
②混合,37℃温育5min。
③在340nm波长读取吸光度A1。
④37℃再准确温育20min后(第2步的5min不算在内),在340nm波长下读取吸光度A2。
⑤若△A(A1-A2)>0.50,用等渗盐水对标本进行5~10倍稀释后重测。
附注:
①本反应体系中加入LDH以除去内源性丙酮酸的干扰。本法的线性范围至少可达180U/L。
②标本勿溶血,血清置室温可保存48h,4℃可保存3~4周,酶活性无显著变化。
③FDP在4~5mmol/L之间测ALD活性最高,更高的底物浓度可出现抑制现象。
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