螯合沉淀法提取C1q
实验概要
本实验用EGTA可将C1q螯合、沉淀。该法简便易行，且所需设备简单。
主要试剂
1. 0.026mol/L EGTA(ethylene glycolbisαaminoethyltetraacetic acid)溶液，pH值7.5；
2. 醋酸盐缓冲液，pH值7.0、0.02mol/L，含有0.75mol/L NaCl和0.01mol/LEDTA；
3. pH值5.0、0.06mol/L EDTA；
4. pH值5.0、0.005mol/L PB，含0.75mol/L NaCl和0.01mol/L EDTA；
5. pH值7.5、0.035mol/L EDTA；
6. pH值7.5、0.02mol/L PB，含0.75mol/L NaCl和0.01mol/L EDTA。
主要设备
电导仪；离心机
实验步骤
1. 收集血清，在冷的pH值7.6、0.026mol/L EDTA溶液中透析4h，然后另换新缓冲液透析11h；
2. 收集沉淀，用以上缓冲液洗一次，然后将沉淀物溶于32ml pH值5.0、0.02mol/L醋酸盐缓冲液中；
3. 将以上配制的溶液用4000ml pH值5.0、0.06mol/L EDTA(电导率相当于0.065mol/L NaCl)，于冷环境下，再透析4h，收集沉淀再洗一次，将沉淀溶解于32ml pH值7.5、0.005mol/L PB中，离心使之澄清；
4. 用pH值7.5、0.035mol/L EDTA冷透析5h，使C1q再沉淀，收集沉淀，洗涤后溶解在16ml pH值7.5、0.02mol/L PB中，即为C1q蛋白溶液，分装，保存。
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