双压线性离子阱质谱用于单克隆抗体分子量测定（二）
图2. 对图1 谱图进行去卷积
由图1 及图2 可以看出：首先，使用Velos pro 双压线性离子阱质谱对完整单克隆抗体（150kD）进行分子量测定，得到的谱图中可见不同电荷态的峰均匀分布（图1）；对其使用ProMass 软件进行去卷积分析，可知所测单克隆抗体分子量为147491Da，且不同糖型得到分辨（图2）。
Velos Pro 线性离子阱质谱用于单克隆抗体轻/ 重链分子量测定
使用DTT 对完整单克隆抗体进行还原处理后，分别对抗体的轻、重链进行分子量测定，结果如下：
图3. LTQ Velos Pro 测定单克隆抗体轻链分子量
图4. LTQ Velos Pro 测定单克隆抗体重链分子量
由图3 及图4 可以看出，对于DTT 处理后的单克隆抗体，分别测定其轻、重链分子量，同样可得不同电荷态的峰均匀分布的谱图；经去卷积后，分别可以得到轻、重链的分子量。其中重链部分的杂峰较多（图4），可能为不同糖型及单抗发生降解所导致。
结论
在本文的研究中，我们使用Velos Pro 双压线性离子阱对完整单克隆抗体及其轻重链进行了分子量测定。结果表明：首先，对于完整单克隆抗体，离子阱质谱可以实现分子量测定并分辨出不同糖型；对于经DTT 还原后的轻、重链，离子阱质谱同样可以测定其分子量和不同糖型。离子阱质谱可满足传统定性分析需求，是未知化合物结构解析的强大武器；在蛋白质药物研究方面，被广泛用于肽图分析、序列鉴定和翻译后修饰研究等。通过本文的研究，我们证明了离子阱质谱同样可以用于单克隆抗体分子量的测定。
同时，由于离子阱质谱可对化合物进行多级质谱解析，在肽段的翻译后修饰研究、尤其是糖链的精细结构解析中起到不可或缺的作用。另外，双压线性离子阱Velos Pro同时具有高压和低压阱，高压阱提供最大化离子捕获、裂解和隔离效率，低压阱提供其他离子阱质谱所无法比拟的分辨率和扫描速率。综上，离子阱质谱亦为生物制药行业相关分析的有力工具。
参考文献
[1] Tonya Pekar Second, Joshua J. Coon, Vlad Zabrouskov. A Novel Dual-Pressure Linear Ion Trap Mass Spectrometer Improves the Analysis of Complex Protein Mixtures[J]. Anal Chem. 2009 September 15; 81(18): 7757–7765.
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技术原理
