肺癌的血清肿瘤标志物检查
近年来，肺癌的肿瘤标志物（tumor marker，TM）研究十分活跃。肺癌常用的肿瘤标志物很多，根据美国NACB准则，这里主要介绍神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胃泌素释放肽前体 （ProGRP）、癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）和鳞状细胞癌相关抗原（SCCA）等几种比较肯定的肿瘤标志物。
表1 国际上不同专家组对肺癌标志物应用的建议
1．神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enol
ase，NSE） 是烯醇化酶的一种同功酶，目前认为它是小细胞肺癌（SCLC）和神经母细胞瘤的肿瘤标志物。烯醇化酶同功酶根据α，β，γ三个亚基的不同，可分为 αα，ββ，γγ，αβ和αγ五种二聚体同功酶。α亚基主要存在于肝，肾等组织；β亚基主要存在于骨骼肌和心肌；γ亚基主要存在于神经组织。γγ亚基组成 的同功酶属神经元和神经内分泌细胞特有，故命名为神经元特异性烯醇化酶，此酶在正常人脑组织中含量最高，起源于神经内分泌细胞的肿瘤组织也有异常表达，研 究发现SCLC也是一种能分泌NSE的神经内分泌性质肿瘤。NSE分子量为87000，pH4.7，是一种酸性蛋白酶，参与糖酵解，主要作用是催化2磷酸 甘油变成烯醇式磷酸丙酮酸。癌肿组织糖酵解作用加强，细胞增殖周期加快，细胞内的NSE释放进入血液增多，导致此酶在血清内含量增高。
【参考值】ELISA：血清 <15μg/L
目前，NSE被公认为SCLC的最有价值的肿瘤标志物之一，它的敏感性为40%～70% ，特异性可达65%～80%，而对非小细胞肺癌的阳性率<20%。被广泛用于小细胞肺癌的辅助诊断、疗效监测以及与非小细胞肺癌的鉴别诊断。
【注意】NSE也存在于正常红细胞和血小板中，标本溶血会影响测定结果，因此采血时要特别注意避免溶血。标本应在采血后60分钟内分 离血清或血浆，以避免红细胞内的NSE漏出，而影响测定结果。
2．胃泌素释放肽前体（pro-gastrin releasing peptide，ProGRP）是 胃泌素释放肽（GRP）相对稳定的前体，是近年来发现的一种新的SCLC肿瘤标志物，它不仅可用于检验地带网SCLC的早期发现，还有助于判断疗效及肿瘤复发。胃泌素释放肽（GRP）最早是1978年从猪胃细胞分离出来的一种胃肠激素，广泛分布于哺乳动物胃肠、肺和神经细胞。一些研究认为，小细胞肺癌具有神经内分泌 特征，肿瘤细胞释放GRP，并且可刺激SCLC细胞生长。但由于其在血清中不稳定，易被降解，半寿期约2min，很难测定其血清浓度。而ProGRP位于 胃泌素释放肽的前端，由27个氨基酸组成，在血液中较为稳定。已知ProGRP有三种分子结构，但其羧基末端有一个共同序列区即胃泌素释放肽前体片断 31-98（ProGRP-31~98），在血液中稳定表达，是测定小细胞肺癌的良好标志物。
【参考值】ProGRP的cutoff值各家报道不一，有＜40 ng/L，也有＜100 ng/L。
国内外的研究表明，ProGRP对小细胞肺癌检测的敏感性、特异性和可靠性方面均优于 NSE。
Molina的研究表明，ProGRP、NSE在SCLC的阳性率分别是73%、64%，ProGRP和NSE联合应 用时阳性率可达88%，提高了小细胞肺癌早期发现可能性。而且对化疗反应、疗效评价、病情监测和肿瘤复发都提供了有价值的信息。
【注 意】
1．ProGRP的稳定性与其他临床常用的肿瘤标志物如CEA、CA125等相比，稳定性较差。有研究表明，血清标本在 2-8℃保存7天ProGRP浓度降低33-60%，在室温保存24h降低38-50%。因此，标本要及时测定或冰冻保存，必要时在血清中添加丝氨酸蛋白 酶抑制剂，防止ProGRP降解，导致错误的结果。
2．肾功能不全患者血清ProGRP可明显升高，注意判断。
3．癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）是目前使用最广 的肿瘤标志物，最初发现于成人结肠癌组织中，1965年由Gold首先报道。CEA是一种结构复杂的可溶性糖蛋白，分子量约为180000，胚胎期主要存 在于胎儿的胃肠管、胰腺和肝脏，出生后明显降低。胃肠道恶性肿瘤时可见血清CEA升高，在其他恶性肿瘤患者的血清中也有升高。因此，CEA是一种广谱肿瘤 标志物。
【参考值】血清＜5μg/L
CEA对肺癌的发现，特别是肺腺癌和大细胞肺癌阳性率高，可达70%，明显高于肺鳞癌；在非小细胞肺癌明显高于小细胞肺癌，并且TNM 分期越高，血清CEA水平也越高。在肺癌引起的胸水中, CEA的阳性率高达75%。CEA对疗效判断及预测复发也具有重要的临床意义。
【注意】吸烟者CEA可以升高，估计33%的吸烟者可＞5μg/L。
4．细胞角蛋白19片段（Cytokeratin-19 fragments，CYFRA 21-1）是 相对较新的肿瘤标志物，用抗细胞角蛋白19片段的两个单克隆抗体进行测定。免疫组织化学研究表明，肺癌中富含细胞角蛋白19片段，CYFRA21-1是 NSCLC最灵敏的肿瘤标志物。CYFRA21-1只代表细胞角蛋白19片段，比组织多肽抗原（TPA，细胞角蛋白8、18、19混合片段）具有更高的特 异性。
【参考值】< 3.3ng/ml。
大量研究表明CYFRA21-1是一种对NSCLC最敏感的肿瘤标志物，尤其对肺鳞癌更是如此。CYFRA21-1对肺癌（不分组织学 类型）的敏感性最高，约47%；肺鳞癌达70%以上，远远高于CEA（18%），对NSCLC的早期发现、疗效监测和预后观察均有重要价值。
【注意】当用冻存的标本测定CYFRA21-1时，融化后的标本应避免剧烈震荡混合，因为剧烈震荡后细胞角蛋白可能会附着在试管壁上， 造成测定结果降低。
5．鳞状细胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCA）是 一种分子量为42000的糖蛋白，最早是从宫颈鳞状细胞癌组织中分离出来，属于肿瘤相关抗原TA-4的亚段，存在于宫颈、头、颈、食管、肺和皮肤等部位的 肿瘤中，是一种较好的鳞癌肿瘤标志物。
【参考 值】< 1.5μg/L
SCCA是肺鳞癌较特异的标志物，肺鳞癌患者中SCCA阳性率为 40%～55%，在其他类型的肺癌中阳性率极低。尽管SCCA的敏感性要低于肺癌的其他标志物，但特异性比较高。
【注意】用于 SCCA检测的样本应避免皮肤和唾液的污染，因为这可能导致结果的错误升高。肾功能障碍也会显著影响SCCA的检测结果。
肿瘤标志物对肺癌的鉴别诊断、病理分型、疗效评价、预后判断有比较重要的意义。但至今尚未发现一种特异性、敏感性均十分理想的肺癌肿瘤标志物，联合 检测有助于提高对肺癌的诊断价值。美国NACB推荐有关肺癌的肿瘤标志物联合检测方案，见表2。
表2 根据肺癌病理学特点NACB推荐的肿瘤标志物
