FE染色介绍
实验原理
正常人骨髓中的贮存铁主要存在于骨髓小粒和幼红细胞中，骨髓中的铁在酸性环境下与亚铁氰化钾作用，形成普鲁士蓝反应，形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀，定位于含铁的部位，从而反映骨髓中铁的储存量。化学反应过程为：
4Fe3+＋3K4［Fe（CN）6］→Fe4〔Fe（CN）6〕3＋12K+
（含铁物质）（亚铁氰化钾）（亚铁氰化铁）
三、实验方法
材料：
1.酸性亚铁氰化钾溶液
200g/L亚铁氰化钾溶液5份
浓盐酸1份
取200g/L亚铁氰化钾溶液置于试管中，缓缓滴加浓盐酸，边滴边摇匀，待烟雾消失后，过滤备用。
2.2g/L核固红-硫酸铝溶液取硫酸铝2g溶于100ml蒸馏水中，再加入核固红0.2g。置370C水浴中1h并随时振荡使其溶解，过滤后备用。
方法：
1.固定干燥骨髓涂片用甲醇固定10min，待干。
2.显示玻片上滴满酸性亚铁氰化钾，370C染色30min。蒸馏水冲洗。
3.复染置核固红液染10-15min。流水冲洗，待干，镜检。
四、实验结果计算
（1）细胞外铁的观察：
细胞外铁呈蓝色的颗粒状、小株状或团块状。以油镜观察定级标准
（-）无铁粒可见。
（+）少数铁粒或铁小珠。
（++）较多铁粒和铁小珠。
（+++）很多铁粒、铁小珠和少数小块。
（++++）极多铁粒、铁小珠并有很多小块，密集成堆。
正常范围：+～++，"+"占2/3，"++"占1/3。
（2）细胞内铁观察：
细胞内铁指有核红细胞胞质内出现蓝色颗粒，以油镜计100个中、晚幼红细胞，记录胞质中含有蓝色小颗粒（即铁粒红细胞）的比值。并根据细胞铁颗粒的数目、大小、染色深浅和颗粒分布情况，将铁粒幼红细胞分为如下四型：
Ⅰ型：仅含1-2个铁颗粒。
Ⅱ型：含3-4个铁颗粒。
Ⅲ型：含6-9个以上铁颗粒。
Ⅳ型：>10个铁颗粒。
正常范围：30%-90%，平均60%。
多见Ⅰ型，少见Ⅱ型，无Ⅲ、Ⅳ型。
（3）环形铁粒幼红细胞：
指含铁颗粒>6个，其中2/3以上铁颗粒围绕核周排列成完整环形或不完整环形。
正常或非铁粒幼细贫血无环形铁粒幼细胞，铁粒幼细贫血中环形铁粒幼细胞>6%。
五、注意事项
1.玻片需去铁化处理将新玻片用清洁液浸泡24h，取出后反复水洗，浸入95%乙醇中24h，晾干，再浸泡再5%盐酸中24h，用双蒸汽反复浸洗玻片，取出烤干后备用。
2.骨髓取材要满意，做细胞外铁时一定要有骨髓碎块或颗粒，取材不佳时，往往影响结果判断。
3.酸性亚铁氰化钾溶液须新鲜配制。
