放射免疫测定技术的原理
放射免疫技术是基于竞争性结合反应原理的放射免疫分析。它是以放射核素标记抗原(*Ag)与反应系统中未标记的抗原(Ag)竞争特异性抗体(Ab)的基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析法。用反应式表示为:
式中,*Ag 为同位素标记的抗原,与未标记的抗原 Ag 有相同的免疫活性,两者以竞争性的方式与特异性抗体 Ab 结合,形成 *Ag-Ab 或 Ag-Ab 复合物,在一定反应时间后达到动态平衡。如果反应系统内加入的*Ag和Ab的量是恒定的,且*Ag 和 Ag 的总和大于 Ab 的有效结合点时,则 *Ag-Ab 生成量受 Ag 量的限制。Ag 增多时,Ag-Ab 生成量也增多,而 *Ag-Ab 生成量则相对地减少,同时,游离*Ag 也增多。因此,*Ag-Ab 与 Ag 的含量成一定的函数关系。如采用一种有效的分离方法,将*Ag-Ab 和 Ag-Ab复合物(以 B 表示)与*Ag、Ag(以 F 表示)分离,并测定 B 和 F 的放射性,可有以下规律:如样品中Ag 增多,则 B 的放射性降低,F的放射性增高,即 Ag 与 B 成反比。计算 B/F 或 B/T 值(T=B+F),即可算出样品中 Ag 的含量。
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