96孔板质粒提取
实验概要
本实验介绍了96孔板质粒提取流程。
主要试剂
异丙醇,乙醇
主要设备
96孔板,高速离心机,水浴锅,通风橱
实验材料
重组大肠杆菌
实验步骤
1. 取lml培养基注板,挑单克隆于96孔板内摇培16-24h;
2. 1500g,离心5min;或4000g,离心3min;
3. 加入200ul溶液I,加牙签盖盖震荡;
4. 加入200ul溶液II,四边晃一下,2-3 min(时间不要过久);
5. 加入200ul溶液III,翻转10次;
6. 沸水浴5 min;
7. 冰浴5 min;
8. 转移裂解产物约300ul至multi-screen;
9. 2500g,离心5min;
10. 加入200ul异丙醇,翻转后迅速离心;
11. 4000g,离心15min;
12. 加入300ul70%乙醇清洗,4000g,离心2min,去上清;
13. 吹干后,加水溶解。
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