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96孔板质粒提取

2019.4.20

实验概要

本实验介绍了96孔板质粒提取流程。

主要试剂

异丙醇,乙醇

主要设备

96孔板,高速离心机,水浴锅,通风橱

实验材料

重组大肠杆菌

实验步骤

1. 取lml培养基注板,挑单克隆于96孔板内摇培16-24h;

2. 1500g,离心5min;或4000g,离心3min;

3. 加入200ul溶液I,加牙签盖盖震荡;

4. 加入200ul溶液II,四边晃一下,2-3 min(时间不要过久);

5. 加入200ul溶液III,翻转10次;

6. 沸水浴5 min;

7. 冰浴5 min;

8. 转移裂解产物约300ul至multi-screen;

9. 2500g,离心5min;

10. 加入200ul异丙醇,翻转后迅速离心;

11. 4000g,离心15min;

12. 加入300ul70%乙醇清洗,4000g,离心2min,去上清;

13. 吹干后,加水溶解。


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