四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱快速筛查和确...（二）
实验与讨论
本实验在20 分钟液相梯度内分析了555 种农药，使用full scan+ddms/ms 采集数据，可同时获得目标化合物的一级质谱XIC 图及其二级全扫描质谱图，如图1 所示。Q Exactive可以实现高灵敏度和高分辨率的统一，即提高分辨率不会显著影响方法灵敏度，多数化合具有很好的响应，可以实现亚ppb 级浓度水平的检测。同时在70,000FWHM 的高分辨率下，方法具有很好的选择性，目标化合不受共流出成分和基质的影响（图2）。即使在一次扫描中包含2 个扫描事件，Q Exactive 依然可以满足UHPLC 的分析要求，如图3 所示，在出峰密集的区域，也可以保证每个色谱峰（约0.1min）都有足够的扫描点数（＞ 15）来满足准确定量和定性需求，并且每个扫描点的质量精度都小于3ppm。
图1. 椒基质中氟嘧菌酯Fluoxastrobin (m/z 459.0866)典型图谱。
（A. 提取离子色谱图，B.ddMS2 采集点，C. 二级全扫描质谱图）
图2. 部分化合物1ppb 基质加标色谱图以及空白基质色谱图
图3. A: 扫描速度满足UHPLC 分析的需求（0.1min 色谱峰大于15 个扫描点）; B: 每个扫描点质量精度图
实验采集的数据使用Thermo 高分辨质谱筛查软件TraceFinder 进行智能且快速的自动化数据分析。TraceFinder是一款多功能流程化软件, 既可采集数据, 也可处理分析数据。可用于多组分同时筛查、确证和定量分析。对化合物的定性确认，除了精确质量数外，TraceFinder 还提供保留时间、同位素分布、主要二级碎片确认和二级质谱图相似度比对等多种方法，综合判断，以得到准确的定性结果，尽可能减少假阳性结果的出现。
本实验在对基质加标样品的分析时，采用精确质量数、保留时间、同位素分布和二级碎片离子等4 个筛查指标来对结果进行确证，保证了筛查结果的准确性。图4- 图6 为辣椒基质中莠灭净的筛查结果。精确质量数和保留时间的匹配结果见图5，实际测定的m/z 与理论值的偏差为1.62ppm，保留时间的偏差为0.01min。同位素的匹配结果见图6，测定结果的同位素分布匹配得分为100%，其中有8 个同位素峰的m/z 与理论值在偏差范围内( ＜ 5ppm)。二级碎片离子的匹配结果见图6，测得的碎片离子与自建数据库中的5 个碎片离子均能匹配。
TraceFinder 除了具有强大的筛查功能外，也支持高分辨质谱定量数据分析，图7 为辣椒基质中噻虫啉的定量分析结果，在0.1ppb-50ppb 范围内，R2=0.9998（n=6）；准确度＜ 5%；精密度RSD ＜ 2%(10ppb,n=3)。
图4. 辣椒基质中莠灭净Ametryn 精确质量数和保留时间的筛查结果
图5. 辣椒基质中莠灭净Ametryn 同位素分布的筛查结果
图6. 辣椒基质中莠灭净Ametryn 二级碎片的筛查结果
图7. 辣椒基质中噻虫啉Thiacloprid 定量分析结果
结论
Q Exactive 具高分辨率、高质量精度、高灵敏度和宽动态范围等特点，是兼具定性和定量功能的质谱分析平台，适合食品安全领域非目标化合物大规模筛查、确证和定量分析。本文采用Q Exactive 和筛查件TraceFinder，建立了6 种蔬菜瓜果基质中555 种农药残留同时筛查和确证的方法，该方法简单、快速、准确、灵敏度高，能同时完成对多农残的定性定量分析。并且建立了该555 种化合物含化合物名称、分子式、精确质量数、保留时间和碎片离子等信息的数据库。本文的实验条件和数据库具有较好的重现性，不同仪器、不同实验室和不同的分析人员均能得到高匹配的筛查结果，节省了方法开发、数据库建立的时间和大量标样购买的成本，便于方法的大规模推广和应用。
