微量制备毛细管电泳实验——单次分离
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. 制备多肽混合物和预处理柱子（见多次分离步骤 1 和 2）。 2. 在 0.5 lb/in2，10 s 内用低压注射上样 0.1 μl 多肽混合物。 3. 使用以下条件分离多肽混合物： 电解质：0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30 探测波长：200 nm 温度：25℃ 电压：7.5 kV 分部大小：每收集管 3 min 4. 用一系列的含 10 μl 4:1（V/V）0.5 mol/L 磷酸钠缓冲液/乙烯乙二醇的微量锥形瓶替换标准的出口池（正极）。收集 3 min 的流分于每一个瓶子用于分析分离的长度。 5. 用分析分离方法（见解析多肽分离实验）筛选含多肽的流分。 展开 |
| 注意事项 | 对于单收集方法，CE仪器必须能有效地控制在高电压水平时的毛细管温度，因为高电压水平是电泳所必需的。鼓风式冷却通常不适合该目的。 |
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