荧光定量PCR标本的采集和处理应该注意什么?
根据实验要求和目的,有针对性采集病灶部位的标本;采集好的标本,最好根据每次实验 用量,用冻存管分成几小份,放在——80℃保存,以免反复冻融;
标本通常分成 3 类,如细 胞组织、分泌物、血清全血;
如果是血清,不能有融血现象的发生,否则会影响PCR的扩 增;
如果是全血,最好不用EDTA作为抗凝剂,选用柠檬酸作为抗凝剂,否则会影响PCR的 扩增;
如果是组织,最好用蛋白酶K消化;
如果是提RNA的标本,更应该防止反复冻融和保 持标本的新鲜。
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