肽类的电泳 (Tricine-SDS-PAGE) 实验
| 实验方法原理 | 在定量分析蛋白质混合物方面，最广泛采用的蛋白质组学方法就是 SDS-PAGE。 因为它根据蛋白质的大小不同分离蛋白，所以对于检测蛋白纯度特别有用，同时也应用于蛋白质相对分子质量（Mr) 的测定。影响到 SDS-PAGE 蛋白分离效果的因素有： ①丙烯酰胺与交联剂（双丙烯酰胺）的比例； ②用于制备浓缩胶和分离胶的丙烯酰胺/双丙烯酰胺的比例；③浓缩胶和分离胶缓冲液 pH 及成分； ④样品制备的方法。 典型 Laemmli 胶系统（Laemmli，1970) 采用甘氨酸电泳缓冲液，能分离分子质量范围. 约 3000?200000Da 的蛋白。本方案中使用的是 ScMgger 和 vonJagow(1987) 的 tricine 凝胶系统，其中用 tricine[三（轻甲基）甲基甘氨酸] 代替了甘氨酸。这一系统可以分离小至 500Da 的肽类，适合 SDS-PAGE 肽图谱以及制备氨基末端、羧基末端测序的样品 |
|---|---|
| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 实验步骤 | 1.按方案 1 制备不连续凝胶。 |
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