高脂肪乳糜对凝血功能测定结果影响的探讨
【摘要】 目的：探讨高脂肪乳糜对凝血功能测定结果的影响。方法：采集双份高脂肪乳糜血，一份采用常温高速离心分离血浆(去脂肪乳糜血浆)，一份采用常规低速离心分离血浆(原血浆)，再用Sysmex CA7000血液凝固分析仪测定去脂肪乳糜血浆和原血浆的凝血酶原时间测定(PT)、活化部分凝血活酶时间测定(APTT)、凝血酶时间测定(TT)和纤维蛋白原测定(FIB)。同时用手工法测定原血浆的PT、APTT、TT和FIB，并对测定结果进行比较。结果：Sysmex CA7000血液凝固分析仪测定原血浆的PT、FIB结果与Sysmex CA7000血液凝固分析仪测定去脂肪乳糜血浆的结果和手工法测定原血浆的结果差异具有统计学意义(P<0.01)，APTT和TT差异无统计学意义(P>0.05)；Sysmex CA7000血液凝固分析仪测定去脂肪乳糜血浆结果与手工法测定结果比较，PT、APTT、FIB、TT四项指标均差异无统计学意义(P>0.05)。结论：高脂肪乳糜对血液凝固分析仪测定PT、FIB的结果有严重的影响，采用常温高速离心分离血浆，可去除高脂肪乳糜对测定结果的影响。
【关键词】 乳糜血；凝血酶原时间；部分活化凝血酶时间；凝血酶时间；纤维蛋白原；血液凝固分析仪
凝血功能是临床实验室常规检查项目，一般包括凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原和凝血酶时间等凝血因子测定。用于手术前检查、血栓病治疗和DIC治疗抗凝剂使用的监测等，是急诊检验项目之一［1］。测定凝血因子的经典方法为手工法，但由于操作较复杂，效率低，不能满足临床大批量标本测定。随着实验室检测技术的发展，目前临床实验室已采用自动血液凝固分析仪批量测定凝血功能。血液凝固分析仪测定结果易受高脂肪乳糜血的干扰，高脂肪乳糜血标本需用手工法测定，给工作带来不便。本文就高脂肪乳糜对血液凝固分析仪测定结果的影响和去除脂肪乳糜干扰的方法进行了探讨，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 标本
乳糜血浆45例来自我院2006年6月至2006年12月门诊和住院患者。采用凝血功能专用真空抗凝管(内含109 mmol/L枸橼酸钠0.2 ml)静脉采血1.8 ml，在4 h内完成测定。
1.2 仪器
SYSMEX CA-7000血液凝固分析仪，日本SYSMEX产品；TGL-16C台式普通高速离心机。
1.3 试剂
采用SYSMEX CA7000血液凝固分析仪原装配套试剂和质控品。
1.4 方法
1.4.1 去脂肪乳糜血浆的制备
收集明显高脂肪乳糜血凝血功能测定标本，以3 000 r/min离心10 min后，得到原血浆。将标本分为2份，一份以13 000 r/min离心10 min后，下层血浆清亮血浆即为去脂肪乳糜血浆。仪器测定法采用SYSMEX CA-7000血液凝固分析仪测定去脂肪乳糜血浆和原血浆的PT、APTT、FIB和TT。用手工法测定原血浆中的PT、APTT、FIB、TT，重复测定2次～3次，取其平均值。
1.4.2 数据处理方法
所有实验数据均采用±s表示，用配对t检验分析。
2 结果
用仪器法测定原血浆的结果与去脂肪乳糜血浆的结果和手工法测定原血浆的结果，见表1。表1 去脂肪乳糜血浆、原血浆的PT、APTT、FIB和TT测定结果(略) 注：#符号表示测不出具体结果，结果以0表示；*为与手工法、去脂肪乳糜血浆仪器法比较，P＜0.01。
从表1可以看出，仪器测定法测定原血浆的PT、FIB测定结果与仪器测定法测定去脂肪乳糜血浆结果和手工法测定原血浆结果差异具有统计学意义(P﹤0.01)，APTT和TT差异无统计学意义(P>0.05)；仪器测定法测定去脂肪乳糜血浆结果与手工法测定结果比较，PT、APTT、FIB、TT四项指标均差异无统计学意义(P>0.05)。
3 讨论
凝血因子PT、APTT、FIB和TT是临床凝血功能判断的常规测定项目，是外科手术前凝血功能异常筛查的必查项目，是血栓前状态的检查、弥漫性血管内凝血出血疾病(DIC)的实验诊断以及对各种抗凝治疗者的用药指导和预后估计等的诊断项目，在临床疾病诊疗中具有重要的价值。测定凝血因子的经典方法为手工测定法，并由国际血液学标准化委员会(ICSH)、国际血栓与止血委员会(ICTH)和美国临床检验标准委员会(NCCLS)等国际权威学术组织制定了测定标准化方案，但由于手工法操作程序复杂，效率低，不能适应于大医院大批量标本的检测。因此，采用自动血液凝固分析仪测定凝血因子是解决大批量标本测定的关键手段，并在各级医院中得到普遍应用。
目前根据测定原理可将自动血液凝固分析仪分为机械振动法和光电比浊法两大类型。光电比浊法测定原理为当一束光(光源卤素灯)通过样品杯，会发生透射和散射，样品杯中的血浆在凝固过程中，纤维蛋白原逐渐转变成纤维蛋白，其理学性状发生改变，导致透射光和散射光强度发生改变，由此判断凝固终点［2］。Sysmex CA7000血液凝固分析仪即为此类仪器，由于其具有测定成本低，对正常外观标本的测定准确度和精密度高，因而在临床实验室中得到广泛使用。从我们的测定结果可以看出，高脂肪乳糜对Sysmex CA7000血液凝固分析仪测定PT、FIB的测定结果有明显的影响，可使FIB测不出结果，PT测定结果偏高。这是由于脂肪乳糜使血浆浊度过高，超过仪器检测范围时，导致仪器不能检测出结果或检验数据不准确。曾有报道用人工添加干扰剂的方法评价Sysmex CA7000血液凝固分析仪的抗高脂肪乳糜血的能力，表明高脂肪乳糜血对检测结果无影响［3］。我们的测定结果也表明：高脂肪乳糜血对APTT、TT的测定结果影响不大，与报道相符，但对PT和FIB的测定结果有明显影响。与手工法测定结果和去除脂肪乳糜血浆测定结果比较具差异有统计学意义(P﹤0.01)。这可能是由于人工添加干扰剂所引起的浊度升高，与体内脂肪乳糜性质不尽相同所致。文献报道去除高脂肪乳糜的方法有标本放置法［2］、低温高速离心法［4，5］等。标本放置法需要很长时间，不能及时检测，延误诊治时机；低温高速离心法对设备要求较高，一般实验室不易装备。我们采用常温高速离心机去除脂肪乳糜的血浆的PT、APTT、TT和FIB的结果与手工法一致，说明常温下采用高速离心(13 000 r/min离心10 min)去除脂肪乳糜对血浆中凝血因子活性无影响。常温高速离心机价格低，实验室容易装备。因此，常温高速离心是一种简便、易行的消除高脂肪乳糜对血液凝固分析仪测定结果的影响的方法。
【参考文献】
［1］熊立凡,李树仁.临床基础检验学［M］.第3版.北京:人民卫生出版社,1989：57.
［2］丛玉隆,王淑娟.今日临床检验学［M］.第1版.北京:中国科学技术出版社,1997：196198.
［3］程大卫,李敏.CA1500型血液凝固分析仪的抗干扰功能［J］.中华医学检验杂志,1999,22(5):309311.
［4］崔冬生,耿玉兰,贺信祥,等.临床乳糜血对凝血检测项目的影响及处理［J］.中国血液流变学杂志,2003,13(1):4041.
［5］陈建芸,石凌波,任峰.高速离心法消除高血脂对凝血酶原时间测定的影响［J］.检验医学, 2005,20(4):401402.
作者：尹玲，王凤学，林光，周里
作者单位：遵义医学院附属医院，贵州 遵义 563003；遵义医学院，贵州 遵义 563003
