生物实验室研究生物样品的低温保存
低温，哪些称作生物和医药学上的低温。生物和医药学上的低温，是个较为宽的溫度范畴。从大部分酶的适宜反映溫度37℃下列到好多个K（开尔文），能够称之为低温（绝对零度为-273.15℃ 即0K）。文中从样品储存的视角，将小于常温下（室内温度，25℃上下）的溫度了解为低温。低温能抑止植物体的生物化学主题活动，它是大自然具有的物理学规律性。依据阿仑尼乌斯（Arrhenius）式子，溫度越低，放热反应速率变慢，样品的储存時间越长。因而，以便使微生物样品在必须的時间内长期保持，大家按不一样要求将样品储存在4℃，-20℃，-80℃ 或溫度更低的电冰箱中，或是储存在液态氮中。文中谈一谈微生物样品低温储存特别是在是冻存时必须留意的某些难题。
1. 长期性储存的机构样品要尽早冻存
样品存贮的溫度对合理储存時间的危害挺大。挑选适合的存贮方法和存贮溫度很关键。但为了确保试验結果的普遍性，学术研究还要充足留意样品在存贮或固定不动前的处理時间和方法。样品从刚开始感受到固定不动或低温储存前这一段时间，仍有某些生物化学全过程在迅速地开展。这种生物化学反映的速率直至样品被固定不动或是低温储存时才明显减少。这过段时间越少越高。针对手术治疗摘除的机构，热缺血性（warm ischemia）時间越少越高；针对实验动物，处决抽样时挣脱時间越少越高。这有利于避免因自然环境更改而造成基因的表达水准或蛋白质磷酸化情况造成很大转变。某些较繁杂的手术治疗将会开展几小时乃至一天到晚，那麼最开始被激光切割但未被切离的那一部分机构将会亲身经历较长的热缺血性時间，可能会导致很大的生物化学转变。以便尽量减少热缺血性的危害，某些诊室专业置放了液氮容器，机构如果切下来就被资金投入液态氮开展急冻（snap freezing）；针对用时较长的手术治疗，许多人先往短期内内切下来有象征性的小一部分机构用以科学研究，随后再开展用时较长的摘除；许多人在标准不足时，选用了将热缺血性情况变为冷缺血性（cold ischemia ）情况的方法降低样品的转变。她们先把切下来的机构放置雪上或4℃ 电冰箱中置放短期内，便捷时再将样品放置-80 ℃电冰箱或液态氮储存。换句话说，从样品刚开始收集到被冻存或固定不动，这一段时间越少越高，通常不必超出20分鐘。或许不一样机构生物化学全过程的转变速度有区分。当机构赶不及冻存时，可将其裁成一块块，放在机构储存液如RNAsafety™中。
2. 样品冻存的优点和缺点
对比于FFPE样品，冻存机构的DNA 和RNA的得率高，片断长，性价比高。可用以基因芯片和全新测序等高通量基因组学检验。有别于FFPE样品，冻存机构内的蛋白（如酶类）依然维持微生物特异性，可用以一些检验。但对冻存样品，必须留意某些难题。冻存机构的形态学检验实际效果有时候比不上FFPE样品细致、极致（比如用以免疫力组织化学检验时）；一些病理学机构内的某些传染性系数冻存后依然维持特异性，解决这种样品时必须分外留意；机构样品中的RNA在-80℃ 冻存时依然并不是长期性平稳的，许多人观查到5年之后RNA出現溶解；核苷酸、蛋白等生物大分子历经不断冻融循环，有将会破裂成较小片断；冻存能耗较多，必须较多专业的室内空间，成本费昂贵；当冻存机器设备产生常见故障时，大量宝贵的样品有将会被毁坏，可能会导致极大的损害；若用液态氮冻存样品时，也要预防冻伤、液氮容器发生爆炸及因室内空间密闭式等造成室息等风险性。
3. 冻存溫度的挑选
前已述及，依据通常的物理学规律性，溫度越低，样品的平稳時间越长。在超低温冰箱问世以前，-20℃ 电冰箱是常见的低温存贮专用工具其一。实践经验，-20℃ 时机构内的生物大分子依然能够被溶解。并且，0至-60℃ 是水的结晶体溫度。结晶体非常容易对体细胞和机构的外部经济构造导致损害，通常没有这一溫度范畴来储存机构和体细胞。某些历经纯化的生物大分子能够在这里一溫度范围之内短期内储存。现阶段，大部分微生物和医学临床研究组织用-80℃ 电冰箱或液态氮冻存微生物样品。-80℃小于不良影响很大的结晶体溫度范畴，都是常见机器设备超低温冰箱能超过的溫度。但在-80℃溫度下，不一样的微生物样品的储存时间不相同的。机构中的DNA能够在-80℃下能够维持多年或更长期。机构中的RNA在-80℃下的可靠性随不一样机构或体细胞而异，但通常不超出5年。
微生物样品的低温储存，是现阶段微生物样品的关键储存方法。在哪儿一溫度下开展储存，必须融合样品自身的特性及试验目地来明确。通常情况下，机构样品内的生物大分子比提纯后的生物大分子不平稳，RNA比DNA容易溶解。机构样品、体细胞样品的快速收集、快速冻存或固定不动针对储存生物大分子的一致性很关键。在开展样品的低温储存时，加上微生物样品储存液，比如RNAsafety™系列产品有机化学保护膜，能够协助减缓生物大分子的溶解系统进程，获得比较理想的科学研究結果。
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