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高效液相色谱法常用的定量方法--自身对照法

2021.12.02

  加校正因子的主成分自身对照法

  测定杂质含量时,可釆用加校正因子的主成分自身对照法。在建立方法时,按各品种项下的规定,精密称(量)取待测物对照品和参比物质对照品各适量,配制待测杂质校正因子的溶液,进样,记录色谱图,按下式计算待测杂质的校正因子。

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  式中 cA为待测物的浓度;

  AA为待测物的峰面积或峰高;

  cB为参比物质的浓度;

  AB为参比物质的峰面积或峰高。

  也可精密称(量)取主成分对照品和杂质对照品各适量,分别配制成不同浓度的溶液,进样,记录色谱图,绘制主成分浓度和杂质浓度对其峰面积的回归曲线,以主成分回归直线斜率与杂质回归直线斜率的比计算校正因子。

  校正因子可直接载入各品种项下,用于校正杂质的实测峰面积,需作校正计算的杂质,通常以主成分为参比,采用相对保留时间定位,其数值一并载入各品种项下。

  测定杂质含量时,按各品种项下规定的杂质限度,将供试品溶液稀释成与杂质限度相当的溶液,作为对照溶液,进样,记录色谱图,必要时,调节纵坐标范围(以噪声水平可接受为限)使对照溶液的主成分色谱峰的峰高约达满量程的10%~25%。除另有规定外,通常含量低于0.5%的杂质,峰面积测量值的相对标准偏差(RSD)应小于10%;含量在0.5%~2%的杂质,峰面积测量值的RSD应小于5%;含量大于2%的杂质,峰面积测量值的RSD应小于2%。然后,取供试品溶液和对照溶液适量,分别进样。除另有规定外,供试品溶液的记录时间,应为主成分色谱峰保留时间的2倍,测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积,分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分的峰面积比较,计算各杂质含量。


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