乙酰胆碱酯酶的测定实验
基本方案
实验方法原理 |
乙酰胆碱水解酶(AChE) 乙酰胆碱+H2O → 胆碱+乙酸 |
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实验材料 | 乙酰胆碱酯酶 |
试剂、试剂盒 | 磷酸钾 氯化乙酰胆碱 白明胶 氢氧化钠 |
实验步骤 |
空白对照:保持 pH 7.4,持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。 样品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.0,并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。 计算 25℃ pH 7.4 时,每分钟一个单位水解的 1 umol 乙酰胆碱。
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注意事项 | |
其他 |
试剂: 0.02 mol/L 磷酸钾,pH 7.0 0.005 mol/L 氯化乙酰胆碱(Mr=181.7;91 mg 溶于 100 ml 水中) 0.01% 白明胶,包括 0.2 mol/L 氯化钠和 0.04 mol/L 氯化钠(0.1 g 白明胶,11.7 g NaCl,8.1 g MgCl2· 6 H2O 溶于 1 L H2O) 0.01 mol/L 氢氧化钠标准溶液作为滴定剂,加入自动滴定器的滴管中 乙酰胆喊酯酶,用 0.02 mol/L 磷酸钾 pH 7.0 稀释到约 20 U/ml
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