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加了dtt的缓冲液在4度放置多久

2021.6.23

DTT在水溶液的半衰期恰好是3-5天,β-ME的更短,只有几十个小时。
普通的SDS-PAGE是还原变性胶,如果loading buffer在4度放置时间较长(>1 week),用来上样的话,就等于做非还原变性胶。
对于普通的蛋白来讲,分子内二硫键很少或者干脆没有,用陈旧的loading buffer和新的loading buffer(临用前补加还原剂)没有什么区别。
如果你的蛋白巯基较多,而且暴露在分子表面,容易氧化形成分子间二硫键,上述两种胶就有很大区别,有可能看见比正常条带大一到几倍的杂带,

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