NK细胞免疫疗法—肿瘤治疗新方向（二）
利用免疫检查点抑制剂来增强 NK 细胞的杀伤能力并应用于治疗也是目前研究的方向之一。某些激活的NK细胞表达PD-1，且 PD-1 信号介导抑制 NK 细胞发挥细胞毒作用。实验证实PD-1单抗（CT-011）增强 NK 细胞对多发性骨髓瘤患者自体骨髓瘤细胞的杀伤能力[6]；NK细胞与MHC-I类分子与作用抑制NK细胞介导的细胞毒性，抑制性KIR已成为NK细胞免疫检查点抑制剂的首选靶标。NK细胞表面KIR类的抑制性受体（KIR2DL1, KIR2DL2 和KIR2DL3）可与MHC-I类分子结合，抑制NK细胞活化，IPH2101 是一种人源化抗KIR单克隆抗体，体外实验结果证实，IPH2101 通过阻断人源 NK 细胞表面 KIR，可显著增强 NK 细胞抗肿瘤能力。
图4. 抗体封闭NK细胞抑制性受体，激活NK细胞
2、嵌合抗原受体（CAR）技术与NK细胞结合
嵌合抗原受体改造的NK细胞，能显著提高NK细胞疗效特异性，其原理亦是在我们先进的NK细胞扩增技术得到的大量NK细胞基础上，通过基因工程修饰，在NK细胞表面表达能够和肿瘤特定抗原结合的嵌合抗原受体(CAR)，回输后能够特异性识别带有特定抗原的肿瘤细胞，引发免疫反应从而达到清除肿瘤细胞的目的。有研究显示CAR-NK 展示出较ADCC更强的细胞毒作用[7]。
CAR-NK细胞治疗的优势[8-9]：
1）异体NK细胞不会引起移植物抗宿主反应（GVHD）；
2）NK细胞治疗不分泌炎症因子致使细胞因子释放综合症发生，如IL-1、IL-6；
3）NK细胞通过自身抗肿瘤的特性，识别并杀伤CAR靶标下调或缺失的肿瘤细胞，提高免疫治疗效果；
4）异体NK细胞的来源广泛：包括外周血，脐带血，NK 细胞株 (NK-92) 与诱导多能干细胞 (iPSC-NK) 等。
图5. CAR-engineered NK cell
德克萨斯大学M.D.安德森癌症中心等研究人员在NEJM杂志公布了美国首个CAR-NK细胞临床试验的结果。研究者从捐赠的脐带血中分离出NK细胞，经过逆转录病毒载体转导相关基因使NK细胞表达理想的嵌合抗原受体(CAR)，用以识别癌症特异性抗原CD19。临床结果显示CAR-NK疗法治疗复发或难治性非霍奇金淋巴瘤(NHL)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者，大多数产生了临床缓解，且未出现主要的毒性作用。
图6 CAR-NK 治疗和缓解后治疗的临床应答
3、双特异性分子联结NK细胞活化受体和肿瘤细胞
NK细胞表面存在自然细胞毒性引发受体（NCRs）、C型凝集素（NKG2D）SLAM家族受体、FcγRIII（CD16）等一系列激活型受体，这些激活型受体结合配体后，能引发细胞因子比如IFN-γ、TNF-α的分泌。
CD16可与肿瘤抗原特异性抗体Fc段结合，介导NK细胞识别并杀伤被抗体包被的肿瘤细胞，即ADCC作用[10]，ADCC是NK细胞杀伤靶细胞的主要方式。以NK细胞表面活化受体CD16和NKG2D为靶点的双特异性分子，可以靶向NK细胞识别并杀伤肿瘤细胞。
Sanofi与法国Innate Pharma达成价值4亿欧元合作，共同开发靶向Nkp46的双特异性抗体，激活NK细胞杀伤肿瘤。Affimed开发双特异性抗体AFM13，CD30×CD16a组合募集和激活NK细胞，并与Genentech达成战略合作协议。
图7. 双特异分子联结NK活化受体和肿瘤细胞
小结与展望
NK 细胞已不再仅仅局限于固有免疫范畴，而是在免疫调控网络中扮演着非常重要的角色，随着对NK细胞的分子特征和功能的进一步探索，开发以NK细胞为基础的靶向免疫治疗将成为肿瘤免疫治疗的新突破。
参考资料
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