三种国产乙型肝炎病毒基因荧光定量试剂检测结果分析
［摘 要］ 目的：探讨上海复星、深圳匹基、上海科华三种国产乙型肝炎病毒基因(HBVDNA)荧光定量试剂的临床检测结果相互之间是否存在差异。方法：将相同的标本分别用三种国产HBVDNA荧光定量试剂进行HBVDNA荧光定量测定。然后再对检测结果进行对比，分析相互之间是否存在差异。结果：23例已知的慢性乙型肝炎患者标本，3例已知正常标本分别用三种国产HBVDNA荧光定量试剂进行HBVDNA定量检测，结果显示三种国产试剂的HBVDNA定量检测结果相互之间差异小于一个数量级占91.4％，大于一个数量级小于二个数量级的占8.6％，经统计学分析差异无显著意义(P>0.05)。结论：上述三种国产HBVDNA荧光定量试剂在同一套设备上的检测结果相互之间差异很小，有很好的准确度，它们的检测结果可以相互进行比较。
［关键词］ 国产试剂盒；HBVDNA荧光定量PCR；差异
Comparison Study Among the 3 Domestic Fluorescence Quantitative PCR Diagnostic Kits for HBVDNA
GUO Huaguo,Chen Guoqiang
(The First People's Hospital of Huanggang City，Huanggang， Hubei 438000，China)
Abstract:Objective To study the difference of the commmerical fluorescence quantitative PCR diagnostic kits for HBVDNA，which were made in china．Methods 26 samples．which we collected from our clinical lab,23 of its were positive in HBVDNA and 3 of its were negative.which were detected by the 3 fluorescence quantitative PCR diagnostic kits．Results There was a good correlation among the 3 domestic fluorescence quantitative PCR diagnostic kits for HBVDNA.No significant difference were observed among the 3 methods．Conclusions There were no significant difference among the 3 domestic diagnostic kits,which were fit for the routine use in the clinical lab,the results can be compared each other．
Key words:Domestic diagnostic kit;Fluorescence quantitative PCR for HBVDNA; Difference
乙型肝炎病毒基因(HBVDNA)检测是反映HBV复制的最直接、可靠的指标，它对乙型肝炎临床诊断、治疗监测以及预后判断有着至关重要的作用［1，3，4］。检测HBVDNA的方法有很多种，每种方法都有其各自的优点、缺点。近几年来发展起来的荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)可以对HBVDNA进行相对定量检测，目前该种方法已经在我国各级医院实验室广泛开展，国内生产HBVDNA的FQPCR试剂厂家也很多，然而各试剂厂家之间尚未形成一个统一的检测标准，因此导致不同医院之间的检测结果难以进行横向比较。本文选用国内试剂厂家中的三种HBVDNA FQPCR试剂盒，对23例已知的慢性乙型肝炎患者血清、3例已知的正常血清进行HBVDNA定量检测，以横向比较三种试剂检测结果之间是否存在差异。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 23例已知的慢性乙型肝炎患者血清采自本院肝病科的慢性乙型肝炎患者，其中大三阳标本11例，小三阳标本12例，3例已知的正常血清采自本院门诊的健康体检者，所有标本均用免疫学方法(酶联免疫)验证。标本处理：所有标本均空腹采取，2 h之内分离血清并分装5管，1管作免疫学检测，1管置于-20 ℃冰箱保存以备需要复查时用，另外3管分别用于三种HBVDNA FQPCR试剂盒的测定用，不能在当日检测的标本均做好标记置于20 ℃冰箱保存。
1.1.2 试剂 三种HBVDNA FQPCR试剂盒都是由市场购买，它们分别是由深圳市匹基生物工程股份有限公司生产，批号20050901，最低检测限5.0×102 copy/ml；上海科华生物工程股份有限公司生产，批号20050818，最低检测限5.0×102 copy/ml；上海生物克隆高技术有限公司生产(上海复星医药集团)，批号20050913，最低检测限4.2×102 copy/ml。
1.2 方法 首先用深圳匹基试剂筛选出23例HBVDNA阳性标本，然后将这23例HBVDNA阳性标本和3例已知的正常血清分别用深圳匹基、上海科华、上海复星三种HBVDNA FQPCR试剂盒进行HBVDNA定量测定。HBVDNAFQPCR测定的操作严格按照各自试剂盒所附说明书进行，每份标本检测3次，结果取平均值，具体方法在此省略。统计学处理 将三组结果进行t检验，差异无显著性，P>0.05。
