斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验
斑点滤膜结合法
| 实验方法原理 | |
|---|---|
| 实验材料 | 待测蛋白质样品 |
| 试剂、试剂盒 | 10％三氯醋酸（TCA） 考马斯亮蓝凝胶染色液 考马斯亮蓝凝胶脱色液 |
| 仪器、耗材 | Whatman 3 MM 滤纸 |
| 实验步骤 |
1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格； 2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品； 3. 将滤纸凉干，大约需要 15 min； 4. 将滤纸浸入 10％ TCA 溶液中 30 s（TCA 溶液可重复使用）； 5. 用水快速漂洗滤纸； 6. 将滤纸浸入考马斯亮蓝凝胶染液中 30 s（染液可重复使用）； 7. 用水快速漂洗滤纸； 8. 在考马斯亮蓝凝胶脱色液中使滤纸脱色，脱色在几分钟之内完成； 9. 通过相应显蓝色的方格，可判断其含有一定量的蛋白质存在。
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