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Annexin V实验过程中阳性率偏高问题分析

2020.5.25

• 细胞本身活力太差。实验中发现未经诱导凋亡的对照细胞经染色后AnnexinV+/PI+双阳性的细胞比例过高,造成这种结果的原因可能是细胞本身活力太差。建议用台盼蓝染色计算细胞的活力,台盼蓝拒染的细胞应大于95%。若活力偏低低,建议重新复苏细胞,通常刚复苏的细胞至少要传代3 次以后才能进行实验。

• 细胞操作不当。贴壁细胞消化过程中反复剧烈吹打导致细胞膜破坏,使得假阳性偏高。

• 凋亡诱导时间过长。一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡,因此通常不需要处理大于48 小时以上,诱导时间过长会使营养物质耗尽,导致细胞状态差,假阳性结果偏高。

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