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需要RNA中间物的复制型转座的介绍

2022.11.10

  逆转录转座子都需要RNA中间物,但LTR逆转录转座子和无LTR逆转录转座子在转座的具体步骤上有很大的差别。

  LTR逆转录转座子进行转座时,形成cDNA的过程与逆转录病毒合成cDNA相同,双链cDNA通过剪切一黏接转座插入靶序列。无LTR逆转录转座子的转座过程较复杂,以LINE为例,转座的基本过程如下:

  ①在RNA polⅡ的催化下,由LINE-DNA转录生成LINE-mRNA。

  ②LINE-mRNA进入细胞质,翻译生成逆转录酶和内切核酸酶。

  ③LINE-mRNA与翻译产物一起返回细胞核,结合到受体DNA富含T的靶位点,复合体中的内切核酸酶在靶位点切开DNA的一条链,产生3'—OH和5‘—磷酸基,并形成RNA—DNA杂合分子短片段。

  ④逆转录酶在靶位点的3'—OH上,以LINE-mRNA为模板,启动逆转录,开始合成cDNA的第一条链。

  ⑤靶位点上的第二条链被内切酶或宿主细胞内的核酸酶切开,产生3'—OH和5‘—磷酸基。新合成的cDNA第一条链与靶位点上的另一条链形成双链短片段,以靶位点上的3'—OH为引物,合成cDNA的第二条链。

  ⑥靶位点上的缺口被宿主DNA聚合酶填补,最终在受体DNA中新插入一个LINE。

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