1.2样品前处理方法

  1.2.1 Cleanert PEP样品提取净化法

  提取:取2g奶粉,加标,然后加12mL 80% 乙腈,涡旋混匀两分钟后,离心(90000r/min, 6min)取3mL上清液,加入9mL超纯水稀释,涡旋混匀后,待过Cleanert PEP柱净化。

  净化步骤:

  1) 活化:以5mL乙腈,5mL水活化Cleanrt PEP;

  2) 上样:把上述稀释后的样品溶液过柱,流速控制以1mL/min为宜;

  3) 淋洗:待样品溶液完全通过小柱后,用5mL 5%乙腈淋洗小柱,然后真空抽干3min;

  4) 洗脱:以3-5mL乙腈洗脱目标,收集流出液;

  5) 浓缩:收集液以氮气浓度吹干(40℃水浴),后以50% 甲醇水定容至1mL,混匀后过0.22μm微孔滤膜过,进LC-MS/MS分析。