流动注射氢化物发生原子吸收光谱法测定蒙药中硒
摘要： [目的] 研究测定蒙药中硒的新方法。[方法]蒙药消化液用盐酸还原处理将六价硒转化为四价硒，以硼氢化钾为还原剂，稀盐酸为载液，用流动注射氢化物发生原子吸收光谱法测定硒。[结果] 方法的检出限为0.12ng/ml，线性范围为0.60—35ng/ml，相对标准偏差为4.7%-6.4%，样品加标回收率为96.6%-102.1%，对人发标准物质进行测定，结果与标准值符合。[结论] 本法具有灵敏度高、选择性好、试剂及样品用量少、操作方便、分析快速（60个样品/h）等优点，有推广应用价值。
随着科学技术的发展，蒙药和中草药中硒的含量与药效密切相关响。因此，测定药物试样中硒含量具有十分重要意义。目前测定硒的方法较多。荧光法是经典方法，灵敏度高，操作繁琐费时[1]；催化光度法和极谱法的稳定性差[2-3]；石墨炉原子吸收法又存在硒的挥发损失[4]；氢化物发生原子吸收法具有高灵敏度和高选择性的优点，手工操作是其缺点[5]。本文采用流动注射氢化物发生电原子吸收光谱法测定蒙药中硒，对测试条件进行研究，取得较好效果。
1 试验部分
1.1 仪器与试剂
原子吸收分光光度计；WNA-1型金属套玻璃高效雾化器，WHG-103A型流动注射氢化物发生器及电加热石英管（北京瀚时制作所）；硒空心阴极灯；控温电热板；回流三角烧瓶。
硒标准储备液（1mg/ml）：用亚硒酸配制；硒标准应用液（500ng/ml）：用3mol/L盐酸稀释储备液配制；硼氢化钾溶液（5g/L）：用4g/L氢氧化钠溶液配制，于4℃冷藏保存，可用1个月；混合酸：硝酸与高氯酸为4:1（体积比）；载液：0.3mol/L盐酸；稀释液：3.0 mol/L 盐酸；载气：高纯氩气；盐酸、硝酸
作者简介：张艾华（1960-），男，内蒙古包头人，包头医学院卫生化学教研室副教授，从事生物样品分析方法学研究。
及氢氧化钠为优级纯，其它试剂为分析纯，实验用水为去离子水，实验所用玻璃器皿用硝酸（1:4）浸泡24h。
1.2 方法原理
测试液是经盐酸还原将六价硒转化为四价硒的酸性溶液。该方法用载气压力作为自动化能源，自动定量吸入硼氢化钾、测试液和载液三种溶液，吸满后，载带测试液的载液和硼氢化钾溶液开始稳流流动，汇合后发生化学反应，反应液和生成的气体氢化物被载气带入气液分离管，混合气进入电热石英管被原子化，由主机测定吸光度。
1.3 实验方法
取一定量硒标准应用液于10ml比色管中，用3mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀，作为测试液。将三根塑料毛细管分别插入载液、测试液和硼氢化钾溶液，按表1原子吸收光谱仪工作参数和表2流动注射氢化物发生器工作条件进行测定。
表1 原子吸收光谱仪工作参数
元素 波长 光谱通带 灯电流 测量方式 （nm） （nm） （mA） |
Se 196.0 0.4 5.0 峰高 |
表2 流动注射氢化物发生器的工作条件
元素 载气流量 石英管电压 KBH4浓度 盐酸载液浓度 （ml/min） （V） （g/L） （mol/L） |
Se 180 110 5 0.3 |
1.4 样品分析
称取样品0.3000g于100ml三角烧瓶中（带回流管），加4.0ml混合酸，置电热板上约100℃消化1h，后高温消化至溶液无色透明且产生高氯酸烟雾时止。溶液冷却后用 3mol/L HCl稀释至10.00ml，放置0.5h,按试验方法测定吸光度，用校正曲线法定量。
结果与讨论
2.1 测试条件的选择
按试验方法，采用单因素变化法确定zui佳试验条件。zui佳条件为：硼氢化钾溶液浓度5g/L，盐酸稀释液浓度3.0 mol/L，盐酸载液浓度0.3mol/L，石英管加热电压110V，氩气流量180ml/min。
2.2 预还原条件的选择
样品经消化处理后，硒以四价和六价形式存在，而六价硒与硼氢化钾反应难生成气体氢化物，因此消化后的溶液需预还原处理，将六价硒还原为四价硒。试验了HCl、KI、抗坏血酸三种还原剂，灵敏度、稳定性均以HCl为好，且与试液用酸相同。本试验以3mol/L HCl为预还原剂。
2.3 共存离子的影响
按试验方法，试验了多种共存离子的影响。结果表明（相对误差不超过±5%）：至少30000倍K+、Na+，20000倍Ca2+、Mg2+，1000倍Fe3+、Fe2+、Zn2+、Al3+、Mn2+、Pb2+、Cd2+、I-、Cr2O72-，400倍Co2+、Ni2+，300倍Cu2+、Ag+，100倍As（Ⅴ），70倍As（Ⅲ）不干扰测定。
2.4 线性范围与检出限
按试验方法测定不同浓度硒标准溶液的吸光度，绘制硒浓度与吸光度关系曲线，得硒浓度在0.60—35ng/ml范围内与吸光度呈线性关系，直线回归方程为A=0.0168x + 0.0051, A为吸光度，x为硒浓度（ng/ml），相关系数r=0.9998。
按试验方法对20个试剂空白溶液进行测定，根据公式L=3Sb/S（Sb为空白溶液的标准偏差，S为回归直线的斜率，即方法的灵敏度，L为检出限）求得方法的检出限为0.12ng/ml。
2.5 精密度与准确度
按样品分析方法对三份蒙药进行分析，同时做加标回收率试验，结果见表3。
表3 样品分析结果（n=6）
样品 测得值 RSD 加标量 测得总量 回收率 （ng/g） （%） （ng/g） （ng/g） （%） |
1 38.0 6.4 50.0 86.3 96.6 2 54.2 4.7 50.0 105.2 102.1 3 74.3 5.2 50.0 123.7 98.8 |
实验结果表明，本法测定蒙药中硒，灵敏度高，选择性好，简便快速，试剂和样品用量少，精密度和准确度均较高，有推广应用价值。
参考文献
[1] 王光亚，周瑞华，孙淑庄.生物样品、水及土壤中痕量硒的荧光测定法[J].营养学报，1985，7（10）：39
[2] 蒋治良.痕量硒的示波极谱测定[J].环境科学，1993，14（6）：66
[3] 张良军.人发中微量硒的催化极谱测定[J].理化检验（化学分册），1991，27（1）：47
[4] 李凭建.血清硒的石墨炉原子吸收光谱法[J].中华预防医学杂志，1993，27（6）：368
[5] 常文静，王敢峰.全血中硒的氢化物发生原子吸收分光光度法测定[J].卫生研究，1996, 25（1）：37
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