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不同植物组织中多糖的提取中AIR的制备

2019.4.17

实验概要

本人总结的多糖提取前AIR制备过程

实验步骤

AIR (alcohol insoluble residue)提取

1)新鲜收取的植物在蒸馏水中清洗以除去培养基等物质,后冻干。

2)将冻干的样品在液氮中研磨成粉末。

3)AIR (alcohol insoluble residue)制备

浮萍、拟南芥叶及根中淀粉含量较高,需要先除去其中淀粉。拟南芥、杨树、芒草等茎秆不需要除淀粉这一步。

Note:不同组织体积不一样,一般液体是粉末体积的3-4倍

80%乙醇

80oC

1h

1次

4000 g 5 min

氯仿:甲醇=2:1

37oC

2h

2次

过滤

65% 乙醇

37oC

30 min

2次

4000 g 5 min

80% 乙醇

37oC

30 min

2次

4000 g 5 min

100%乙醇

37oC

30 min

2次

4000 g 5 min

100%丙酮

37oC

2h

2次

4000 g 5 min

70oC 真空干燥

根据实验室已有的淀粉降解法降解淀粉,加入5倍体积无水乙醇,4oC沉淀过夜,离心,常规干燥,即为AIR。


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