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BIOG RNA Swab Kit（拭子RNA提取试剂盒）使用说明

2020.6.01

试剂盒组成

组分	50次	100次
吸附柱和收集管	各50个	各100个
裂解液	12 mL	24 mL
析出液	4.5 mL	9 mL
洗涤液	9 mL	18 mL
洗脱液	3mL	6 mL
消化液	1.2 mL	2.4 mL
说明书	1份	1份

产品介绍

BIOG RNA Swab Kit是常州百代生物科技有限公司研制的专门用于提取各种口腔拭子、泌尿生殖道拭子及痰液样本中的RNA的试剂盒。BIOG RNA Swab Kit采用了最新的优质进口离子膜，裂解液和洗脱液经过多次优化，能高效地分离RNA。提取得到的RNA较其它品牌的同类试剂盒产量更大，纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。

操作步骤

请自行准备：无水乙醇、生理盐水、1M NaOH、无RNA酶1.5mL离心管。
取出析出液和洗涤液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。

b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。

c) 配制好的析出液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

样本处理：a) 拭子：向无RNA酶的1.5mL离心管中加入800μL生理盐水，将拭子收集的样本置于生理盐水中，涮洗20秒，使细胞完全脱落，贴离心管壁挤干拭子上的液体，12,000 rpm 离心5 min。
b) 痰液：向收集的痰液中加入4倍体积1M NaOH，室温放置30分钟，每10分钟振荡混匀一次，12,000 rpm离心5 min，弃上清，加入0.5mL生理盐水，混匀，12,000 rpm离心5 min。

弃700或400 μL上清，剩余100μL上清，充分振荡混匀15秒，加入200μL 裂解液和20μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。

加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。

将吸附柱放入收集管内，将上述溶液吸入吸附柱内，静置2 min，12,000 rpm 4℃离心1 min，弃收集管内废液。

将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 min，弃收集管内废液。

将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 min，离去残留的洗涤液。

取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-50 μL 洗脱液，静置3 min，12,000 rpm 4℃ 离心2 min，收集RNA溶液。

-70℃保存，或直接用于下一步实验。

注意事项：

1. 为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水。

2. 析出液、洗涤液均含有刺激性化学物质，请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清

水或生理盐水冲洗，必要时请就医。

3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。