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大鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒技术原理

2020.6.01

ELISA试剂盒组成及试剂配制(以下为ELISA试剂盒通用说明书,不包括特别的试剂盒,具体的请参照每个产品的说明书 欢迎来电索取!)

1. 酶联板:一块(96孔)

2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,600pg/ml,将其稀释为400 pg/ml后,再做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释成400 pg/ml,200pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制200 pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3. 样品稀释液:1×20ml。

4. 检测稀释液A:1×10ml。

5. 检测稀释液B:1×10ml。

6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。

8. 底物溶液:1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

11. 覆膜:5张

12. 使用说明书:1份

自备物品

  1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)

2. 微量加液器及吸头,EP管

3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸

标本的采集及保存

  1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3. 其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

4. 样本处理:血清或血浆标本推荐稀释5,000倍。

注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;

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